《实验聚丙烯酰胺》课件.pptxVIP

实验 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白精选PPT实验目的精选PPT掌握盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳的基本原理熟悉盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳的操作技术实验原理精选PPT以聚丙烯酰胺凝胶做支持物的电泳技术是聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）。聚丙烯酰胺凝胶是单体聚丙烯酰胺（Acr)和交联剂甲叉双丙烯酰胺(Bis)交联而成的，催化剂为过硫酸铵(AP)，加速剂为四甲基乙二胺TEMED, 形成三维网状凝胶。聚丙烯酰胺凝胶（PAG）的聚合反应： 由单体聚丙烯酰胺(Acr)和甲叉双丙烯酰胺(Bis)交联而成的三维网状结构凝胶。 Bis：交联剂 过硫酸铵(AP) ：引发剂，提供自由基， 引发聚合反应 四甲基乙二胺(TEMED)：催化剂, 加快引发 释放自由基的速度三大效应聚丙烯酰胺凝胶电泳采用不连续系统（即缓冲液成分、pH及凝胶孔径不连续）聚丙烯酰胺凝胶电泳，通过浓缩效应、分子筛效应、电荷效应，将血清中各蛋白质成份依其分子大小、电荷多少不同而进行高效分离。 分离机制： 1. 浓缩效应 凝胶层孔径不连续：浓缩胶大孔径，分离胶小孔径缓冲液离子不连续：电泳液中Gly-(慢离子)； 凝胶中 Cl-(快离子)；Pr-介于二者之间pH值不连续：电泳缓冲液pH=8.3；浓缩胶pH=6.7； 分离胶pH=8.9电位梯度不连续精选PPT