实验血糖测定(葡萄糖氧化酶法).pdfVIP

. 实验 血糖测定（葡萄糖氧化酶法） 【目的】 体外测定血清或血浆中葡萄糖含量。 【临床意义】 葡萄糖的准确测定对于诊断高血糖症是十分重要的。 通常在查找这些病症的 起因时，还将各种耐量试验和抑制试验与葡萄糖测定一同进行。 葡萄糖含量增高 见于：糖尿病、葡萄糖摄入过量、柯兴氏综合症、脑血管意外。葡萄糖含量减少 见于：胰岛瘤、胰岛素过量、先天性碳水化合物代谢障碍。 【原理】 样本中的葡萄糖经葡萄糖氧化酶作用生成葡萄糖酸和过氧化氢， 后者在过氧 化物酶的作用下， 将还原性 4- 氨基安替比林与酚偶联缩合成可被分光光度计测定 的醌类化合物。 【器材】 紫外分光光度计，恒温水浴箱，移液器（枪），枪头，试管 【药品】 葡萄糖测定试剂盒，试剂盒主要成分与浓度： 试剂 主要成分 实验浓度 R1 葡萄糖氧化酶（ GOD） ≥13000U/L 过氧化物酶（ POD） ≥900U/L R2 磷酸缓冲液（ pH7.0） 100mmol/L 酚 11mmol/L 4- 氨基安替吡啉 0.77mmol/L 葡萄糖标准液 5.55mmol/L(100mg/dl) 【样本】 新鲜无溶血血清。 【步骤】 将 10ml R1与90ml R2混合均匀，即为工作液。 1 / 2 . 空白管 校准管 样品管 工作液 1.50 ml 1.50 ml 1.50 ml 蒸馏水 0.01 ml —— —— 校准液 —— 0.01 ml —— 样品 —— —— 0.01 ml 分别混合均匀， 37℃水浴 10～15分钟（避免太阳光直射），用波长 505nm、 比色杯光径 1.0cm，用空白管调“零”点测定各管的吸光度（ A）值。 【计算】 【参考值】 血清 / 血浆： 3.89 —6.11 mmol/L (70 — 110 mg/dl) 。 此范围仅供参考，各实验室须建立本室的参考值范围。 【参考文献】 1．全国临床检验操作规程 （第二版），主编：叶应妩，王敏三， 1997，P616. 2 ．Trinder P. Ann Clin Biochem ，1969，6: 24-27. 血糖测定实验所需器材： 1. 紫外分光光度计（比色杯光径 1.0cm）， 2. 恒温水浴箱（能调温度的， 37℃）， 3. 移液器（枪）（规格 1.0ml 6 个， 20 μl 6个），枪头各 100个 4. 试管50支，6个试管架 5. 烧杯 100ml一个， 50ml （或25ml）6个 6. 记号笔 6 支 7. 蒸馏水 1 瓶