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输血科技术操作规范 第一节 ABO血型鉴定操作规程 【目的】 正确鉴定血型，保障患者的输血安全。 【范围】 所有送检需要鉴定ABO和RhD血型的标本。 【职责】 输血科负责临床患者的血型鉴定。 【程序】 ABO血型鉴定 原理：根据ABO血型分类原则，即红细胞上带有什么抗原就称什么血型、同一个体内 抗原与抗体互补。根据含某抗原的红细胞与含相应抗体的血清混合可使红细胞发生凝 集，反之不发生凝集的原理，利用分型血清或分型红细胞鉴别血型，前者称为正定型 （又称红细胞定型），后者称为反定型（又称血清定型）。通过正反定型可准确鉴别ABO 血型。 （2）试管法 a)取洁净小试管（内径10mm×60mm）5支，分别标明抗-A，抗-B，A细胞、B细胞和O 细胞。 b)抗-A,抗-B管中分别按标记加入相应抗体血清2滴，并加入受检者3%～5%红细胞悬液 1滴，混匀。 c)A、B和O细胞管分别按标记加入相应3%～5%标准红细胞盐水悬液1滴，并加入受检者 血清2滴，混匀。 d)以1500r/min离心1min。 e)轻轻摇动试管，肉眼观察有无凝集现象，必要时须用低倍镜检查。 （3）微柱凝胶法（卡式血型鉴定） a)将代待检标本配成（0.5%～0.8%）红细胞生理盐水悬液。 b)将微柱凝胶卡标号。 c)正定型：将待检红细胞标本分别加入第一至第三支微管中，或第四至第六支微管中， 每管50ul； d)带反定型的微柱卡：将待检红细胞标本分别加入第一至第三支微管中，第四至第六支 微管中分别依次加入O型、A型、B型（0.5%～0.8%）标准红细胞生理盐水悬液后再加 入待检血清，每次加50ul。 d)即刻使用专用离心机离心5min，2min900rpm,3min1500rpm,取出后判定结果。 (4)结果判定 a)试管法 正定型（细胞定型） 反定型（血清定型） _____________________________________________ 受检者血型 抗-A 抗-B A细胞 B细胞 O细胞 + O O + O A O + + O O B O O + + O O + + O O O AB b)微柱凝胶法 正定型（细胞定型） 反定型（血清定型） _________________________________________________________ 受检者血型 抗-A 抗-B DVI Ctl A细胞 B细胞 + O + O O + A,RhD+ O + + O + O B,RhD+ O O + O + + O,RhD+ + + + O O O AB,RhD+ 规格：抗A效价≥128；抗B效价≥128;抗D效价≥64 【注意事项】 1.严格按操作规程操作操作，认真核对标本并做好标记。 2.所用试管、滴管和玻片必须清洁干净，标本不能被细菌污染，防止溶血或出现假阳性结果。 3.一般应先加血清，然后再加红细胞悬液，以便容易核实是否漏加血清。 4.抗血清每次使用完后，应放回冰箱保存，以免细菌污染。 5.为了防止冷凝集现象的干扰，一般应在室温下进行试验。 6.严格控制离心速度和时间，防止假阳性或假阴性结果。 7.观察时应注意红细胞呈特异性凝集、继发性凝固以及缗钱状排列的区别。 8.未用的微柱凝胶免疫检测卡应入室温保存，用完后放4℃冰箱保存1周。 9.观察结果时，若出现溶血现象，表明存在抗原抗体反应并有补体激活，应视为凝集。 10.判断结果后应仔细核对，记录，避免笔