生物《DNA重组技术的基本工具》课件(新人教版选修.pptxVIP

选修3现代生物科技专题专题1 基因工程DNA重组技术的基本工具基因工程的基本操作程序基因工程应用蛋白质工程的崛起基因工程的概念是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组技术和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的生物类型和生物产品，由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫DNA重组技术；也叫基因拼接技术。基因工程概念的分析基因工程的别名操作环境操作对象操作水平原理目的基因拼接技术或DNA重组技术生物体外基因DNA分子水平基因重组人类需要的生物类型和生物产品基础理论和技术的发展催生了基因工程20世纪中叶,基础理论取得了重大突破 DNA是遗传物质的证明 DNA双螺旋结构和中心法则的确立 遗传密码的破译技术发明使基因工程的实施成为可能 基因转移载体的发现 工具酶的发现 DNA合成和测序技术的发明 DNA体外重组的实现 重组DNA表达实验的成功 第一例转基因动物问世 PCR技术的发明科学、技术、社会的关系科学提供对自然界的说明，技术将科学原理转化为工艺和产品，从而造福于人类社会。科学、技术、社会的互动，不断调整着人类与自然界的关系，推动着文明的进展。1.1 DNA重组技术的基本工具专题1 基因工程转基因抗虫棉抗虫棉普通棉抗虫害的玉米转入抗寒基因的番茄转基因鲑鱼基因工程培育抗虫棉的简要过程：苏云金芽孢杆菌普通棉花(无抗虫特性)提取与运载体DNA拼接导入抗虫基因棉花细胞(含抗虫基因)棉花植株(有抗虫特性)上述培育抗虫棉的关键步骤是什么？基因工程培育抗虫棉的关键步骤：关键步骤一：抗虫基因从苏云金芽孢杆菌细胞内提取出来基因的剪刀——限制性内切酶关键步骤二：抗虫基因与运载体DNA连接基因的针线——DNA连接酶关键步骤三：抗虫基因导入受体(棉花)细胞基因的运载工具——运载体 1、来源： 2、种类：3、作用：粘性末端4、结果：平末端一、 “分子手术刀” ——限制性核酸内切酶主要是从原核生物中分离纯化出来的一种酶。能将外来的DNA切断，由于这种切割作用是在DNA分子内部进行的，故名限制性内切酶。4000种。识别双链DNA 分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。形成两种末端什么叫黏性末端？ 大肠杆菌(E.coli)的一种限制酶能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开。限制酶什么叫黏性末端？限制酶什么叫黏性末端？ 被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。什么叫平末端？ 当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时，切开的DNA两条单链的切口，是平整的，这样的切口叫平末端。E·coli DNA连接酶T4 DNA连接酶 1、种类：2、作用部位：两类磷酸二酯键 DNA连接酶可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来，即把梯子两边扶手的断口连接起来，这样一个重组的DNA分子就形成了。二、 “分子缝合针” —— DNA连接酶三、 “分子运输车” —— 载体外源基因(如抗虫基因)怎样才能导入受体细胞(如棉花细胞)？基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”。　要让一个从甲生物细胞内取出来的基因在乙生物体内进行表达，首先得将这个基因送到乙生物的细胞内去。能将外源基因送入细胞的工具就是运载体。1.作用：2.种类： 质粒、λ噬菌体的衍生物和动植物病毒等。 将外源基因送入受体细胞。 质粒的特点质粒是基因工程最常用的载体。 质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌染色体（即拟核DNA）之外，并且具有自我复制能力的双链环状DNA分子。 最常用的质粒是大肠杆菌的质粒，其中常含有抗药基因，如四环素的标记基因。质粒的存在与否对受体细胞生存没有决定性作用，但复制只能在受体细胞内完成。3.作为载体必须具备的条件1.假如目的基因导入受体细胞后不能复制将怎样？2.作为载体没有切割位点将怎样？3.目的基因是否进入受体细胞，你如何去察觉？4.如果载体对受体细胞有害将怎样？ 作为运载体必须具备的条件能够在受体细胞中自我复制并稳定地保存。具有一个或多个限制酶切点，以便与外源基因连接。具有某些标记基因，便于进行筛选。必需是安全的，不会对受体细胞有害。注意：真正用作运载体的质粒都是人工改造过的。主要存在于原核生物中具有专一性(识别序列)切开DNA分子的磷酸二酯键限制酶连接磷酸二酯键DNA连接酶基因工程的工具E.coliDNA连接酶T4 DNA连接酶种类1.结构简单,大小适中能在宿主细胞中自我复制并稳定存在2.具一个多个限制酶切位点3.具标记基因4.安全的，不会对受体细胞有害具备的条件运载工具质粒、λ噬菌体衍生物、动植物病毒小结DNA聚合酶与DNA连接酶相同区别DNA聚合酶DNA连接酶在单链上将一个个脱氧核苷酸连接起来形成磷酸二酯键将两个DNA片段连接起来；将