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文档如有侵权，请联系本人协改正删除，内容如有不当之处，请联系本人改正或者删除，谢谢。 鸡基因组的PCRRFLP分析 一、试验方法 1、鸡基因组DNA提取 2、目基因PCR扩增 3、内切酶消化PCR产物 4、琼脂糖凝胶电泳（检测基因型） 鸡DNA获取 1、鸡翅下静脉采集全血; 2%EDTA抗凝; 2、DNA提取: 裂解细胞核（红细胞+白细胞） 酚-氯仿去除蛋白质 酶解RNA 获取DNA PCR扩增 1、引物设计（Genbank）; 2、聚合酶链反应（polymerase chain reaction, PCR） PCR反应体系 DNA模板 dNTP Taq DNA聚合酶 引物 Mg2+ 缓冲液 PCR反应程序 预变性 94℃ 3~5min 35循环: 变性 94 ℃ 30s~1min 退火 50~65 ℃ 30~60s 延伸 72 ℃ 1~2min 后延伸 72 ℃ 5~10min PCR产物电泳检测结果 PCR产物+缓冲液+内切酶 5‘-TCATGA-3’ 3’-AGTACT-5’ 内切酶消化PC