电镜切片样品制作步骤.docxVIP

______________________________________________________________________________________________________________ 扫描电镜样品的准备 悬浮培养的细胞、细菌、血细胞、精子等； 细胞使用 PBS 或无血清培养基离心漂洗 1~2 次以去除血清， 离心转速依据不同离心机、 不同样品自定，总时间控制在 5min 内；细胞团根据预设浓度在适量 2.5% 戊二醛吹悬，滴 加在预先置入青霉素小瓶中的托盘， 4 ℃静置沉降 2~3 天，在托盘周围加入 PBS ，以防止样 品干燥。 贴壁培养的细胞： 在培养皿中预先加入盖玻片，使细胞贴附于盖玻片上； PBS 或无需请培养基漂洗后，放置 在培养板室温固定 1h，4 ℃ 3 h ，注意放置干燥， 自行转入青霉素小瓶中， 加满 PBS 送检。 SEM 标本处理必须使用玻璃容器，需明确所用盖玻片尺寸可以放入青霉素瓶。 组织取材 样品观察表面可达 8~10mm 2 ,高度小于 5mm 左右； 样品表面在固定前必须清洁：使用生理盐水或 PBS 冲洗掉表面的灰尘以及不需要观察的蛋 白、粘液等。能够明确标识标本的观察面。消化道、呼吸道、血管、生殖器官、泌尿等官腔 内表面，尤其要注意先清洗再固定。 如需要观察脏器内结构，应依照不同的实验目的，决定目的脏器是否