蛋白质一级结构的测定.ppt

　蛋白质一级结构的测定; 蛋白质的一级结构指：蛋白质多肽链中氨基酸的排列顺序，包括二硫键的位置。组成一个蛋白质分子的多肽链的数目和多肽链中氨基酸的精确序列是蛋白质一级结构的两个重要方面。 其中最重要的是多肽链的氨基酸顺序，它是蛋白质生物功能的基础。;包括以下几方面内容： 　①多肽链的数目； 　②每条多肽链中氨基酸的种类、残 基数目和排列次序； 　③链内或链间二硫键的位置和数目。;蛋白质一级结构测定的策略;从蛋白质开始的蛋白质序列分析;测定的基本策略;测定一级结构的准备工作;测定一级结构的基本步骤;测得相对分子质量Mr 很多方法可用于确定蛋白质的相对分子量，如：渗透压、扩散系数、沉降系数凝胶过滤、凝胶电泳等， 测定末端氨基酸数x X ÷ (m /Mr ) = n (蛋白质分子中肽链数目)（m为样品质量）;蛋白质中多肽链的拆分;多肽链的拆分;氨基酸组成分析;末端氨基酸分析;多肽— OC—CH—NH2 +;将肽链裂解成小片断;可得到合适大小的肽片断;Cyanogen bromide(溴化氰法）;肽段氨基酸序列的测定;Edman 降解法测定N-末端氨基酸;肽片断在多肽链中排列次序的确定 (见p179);多肽链中二硫键位置的确定;多肽链氨基酸系列的直接测定：最初于1954年由英国剑桥大学的Sanger实验