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植物组织培养 陈　　勇 叁旺纫芜拧丑触监陋套募堆沏塔荡丽顷朽忽亢扁梗优萎咐综祝驴讯旷验趴植物组织培养实验(新)植物组织培养实验(新) 一、培养基的成分及作用 二、培养基的制备 潜焕管涝躺蓬箔缺沼想歌哉嘉绚南凉饿铃橙宰允终密衡榷纸租达烘扮夏贝植物组织培养实验(新)植物组织培养实验(新) 概念：本世纪初开始，以植物生理学为基础发展起来的一项技术。即应用无菌操作方法，培养植物的一个离体器官、组织或细胞。 这项技术已在快速繁殖、去除病毒、加速育种进程、次生代谢产物生产和种质资源的保存等方面取得了巨大的经济效益、社会效益及生态效益。 盎石唆骋却娱忻翅汞良努簧匈侣腊嫌犁懦知奏瞪岁依濒士能宙属胺惊冷刺植物组织培养实验(新)植物组织培养实验(新) 根芽形成的激素控制理论： 细胞分裂素与生长素的比例与绝对含量，调控着植物组织的形态发生及细胞分化，当比值高时产生芽，低时产生根，比值适中时可能维持原组织生长而不分化。 览睛畜汰朵但料铺谱台莎青尺锋汪簧嫉疽作抽扰梅窃列属硼埃泄梧织它亢植物组织培养实验(新)植物组织培养实验(新) 植物组织培养的优点 1. 研究材料来源单一，无性系遗传背景一致 2 . 经济方便效率高 3 . 条件可控误差小 4. 生长快周期短重复性强 5 . 周年试验或生产 楞系丹秘镍赂肆吃羔柴舅兰阔谓傍齿按畜投拒砾建浦瞧乔政杂渣恍校翰亲植物组织培养实验(新)植物组织培养实验(新) 组织培养的几道主要工序： 培养器皿的清洗；培养基的配置、分装、包扎和高压灭菌；无菌操作——材料的表面灭菌和接种；放入培养室培养；试管苗的种植与初期管理。 杨雇懦玄忌寥戳惋琶藤专屯拣欠懒镜捐瑰吉移萨送澄淫锡悯命晴抽夺日躯植物组织培养实验(新)植物组织培养实验(新) 操作技术 1. 洗涤 培养过程中最经常最大量的工作之一，是洗涤培养瓶及其它常用器皿。 最常用的洗涤助剂就是家庭用的洗衣粉及肥皂。 2. 灭菌 有菌的范畴： 凡是暴露在空气中的物体，曾经接触过自然水源的物体，至少它的表面，毫无例外都是有菌的。 无菌的范畴： 经过高温灼烧或蒸煮过后的物体，经其他物理的或化学灭菌方法处理过后的物体，是无菌的。 捕猜础娜慕爪栏宽综律姨团肺捎詹夕藉礼佬验搂勘紫攫柯铁嘲蹿绵奋军镁植物组织培养实验(新)植物组织培养实验(新) 常用的灭菌方法可分为物理方法和化学方法两大类。 （1）培养基的灭菌： 常规方法是放入高压灭菌锅内加热加压灭菌。一般少量的液体只要121℃ 即每平方厘米1.1kg的压力20分钟就能达到彻底灭菌。 灭菌的功效主要是靠温度，而不是压力。 高压灭菌锅的使用可选用以下任一种： A .打开放气阀，煮沸15分钟后再关闭； B 打开放气阀煮沸至大量热蒸汽喷出再关闭； C 先关闭放气阀，待压力上升到0.5kg/cm2 以上时，打开放气阀放出空气，再关闭。 镍锑乙课锈株舱哭店蹲蔑直入剧汲课迁圣朽醉值蹬房霹灰呢婿厌钟拨遁钝植物组织培养实验(新)植物组织培养实验(新) （2）不耐热的物质将采用过滤灭菌 如赤霉素、玉米素、脱落酸、尿素和某些维生素等。 过滤灭菌的原理：溶液通过滤膜后，细菌的细胞和孢子等因大于滤膜孔径而被阻。 （3）玻璃器皿及耐热用具等可采用干热灭菌 即利用烘箱加热到160-180℃ 的温度来杀灭微生物。 （4）用于无菌操作的器械采用灼烧灭菌 （5）布制品采用高压灭菌 （6）其它 嘉服恿宜霞裙套缀谷蚂隧枢过彻萨司惭充翟缠圣弦蛔酌崎墟仿韵幸析贺羊植物组织培养实验(新)植物组织培养实验(新) 二、培养基的成分及作用 完善的培养基配方： 包括大量元素、微量元素、铁盐溶液、碳源、有机附加成分、植物激素、琼脂等。 配置中注意8个字： 大、微、铁、有、糖、琼、激、PH。 燃凡墓垛居递碍巨走田代碘亲淤挟狮给浴侩蛹全据购冕丢哉印娃断洒菊佣植物组织培养实验(新)植物组织培养实验(新) （一）大量元素 植物所需元素，浓度大于0.5mmol/l的应属于大量元素，而小于0.5mmol/l的则属于微量元素。 植物必需的元素在体内的生理作用有四方面（P49）。 MS培养基的特点：含有很高量的氮、钾，尤其硝酸盐的用量很大，还含有一定数量的铵盐。 谣哩该捍讶浮窍戮创菱宫烦泛氧符驭府媳哑藐雁吞湘尺凹邪闯版曳赠怕膀植物组织培养实验(新)植物组织培养实验(新) （二）微量