一步法可视化检测新型冠状病毒核酸的引物组和试剂盒发明专利.pdfVIP

一步法可视化检测新型冠状病毒核酸的引物组和试剂盒发明专利.pdf

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(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 112646932 A (43)申请公布日 2021.04.13 (21)申请号 202110022339.1 (22)申请日 2021.01.08 (71)申请人 湖南超亟检测技术有限责任公司 地址 410000 湖南省长沙市高新开发区谷 苑路229号海凭园4栋901室 (72)发明人 张何 李石 陈小洪 刘祖源  刘美慧 杨梅 綦梓伊  (74)专利代理机构 北京高沃律师事务所 11569 代理人 董大媛 (51)Int.Cl. C12Q 1/70 (2006.01) C12Q 1/6844 (2018.01) C12N 15/11 (2006.01) 权利要求书1页 说明书10页 序列表2页 附图5页 (54)发明名称 一步法可视化检测新型冠状病毒核酸的引 物组和试剂盒 (57)摘要 本发明提供了一步法可视化检测新型冠状 病毒的引物组和试剂盒,属于新型冠状病毒检测 技术领域,所述引物组包括F3、B3、FIP‑1、BIP‑1、 FL‑1和BL‑1;所述F3、B3、FIP‑1、BIP‑1、FL‑1和 BL‑1的核苷酸序列分别如SEQ  ID No.1~SEQ  ID  No.6所示;所述试剂盒,包括所述的引物组和检 测试剂,所述检测试剂包括酶检测混合液、盐酸 胍和pH指示剂;所述酶检测混合液中包括Taq  SSB。本发明所述引物组及试剂盒在检测的过程 中,不需要核酸提取,采用浸泡于灭活型病毒保 存液中的鼻/咽拭子样品即可检测;病毒RNA扩增 A 后反应溶液颜色发生改变,通过肉眼观察即可判 2 别结果。 3 9 6 4 6 2 1 1 N C CN 112646932 A 权 利 要 求 书 1/1页 1.一步法可视化检测新型冠状病毒的引物组,其特征在于,包括F3、B3、FIP‑1、BIP‑1、 FL‑1和BL‑1;所述F3、B3、FIP‑1、BIP‑1、FL‑1和BL‑1的核苷酸序列分别如SEQ  ID No.1~SEQ  ID No.6所示。 2.一步法可视化检测新型冠状病毒的试剂盒,其特征在于,包括权利要求1所述的引物 组和检测试剂,所述检测试剂包括酶检测混合液、盐酸胍和pH指示剂;所述酶检测混合液中 包括Taq SSB。 3.根据权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,所述Taq SSB的使用浓度为2~4ng/μL。 4.根据权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,所述酶检测混合液还包括30~50mmol/L 的Tris‑HCl、15~25mmol/L的(NH) SO 、90~110mmol/L的KCl、14~25mmol/L的MgSO 、体积 4 2 4 4 百分含量为0.1%~0.3%的Tween 20、2.5~3.0mmol/L的dNTP、1.3~1.5mmol/L的dUTP、16 ~30U DNA聚合酶、15~30U的反转录酶和10~30U重组尿嘧啶‑DNA糖基化酶。 5.根据权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,所述盐酸胍的使用浓度为30~60mmol/ L。 6.根据权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括灭活型病毒保存液。 7.根据权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,所述F3、B3、FIP‑1、BIP‑1、FL‑1和BL‑1的 使用浓度分别为1.5~2.5μmol/L、

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