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补阳还五汤加减治疗脑梗塞后遗症心得 补阳还五汤加减治疗脑梗塞后遗症心得 人参皂苷提取工艺的研究 【中图分类号】Ｒ２８４．１　　　　【文献标识码】Ａ　　　　【文章编号】１６７２－３７８３（２０１２）０４－０３５８－０１ 【摘要】为提高人参皂苷的提取率和纯度，本文以人参皂苷Ｒｅ和Ｒｂ１为指标，比较了回流提取法、超声水提法、湿法粉碎提取法３种不同方法提取人参皂苷的优劣。结果表明：回流提取法、超声水提法湿法、湿法粉碎提取法人参皂苷Ｒｅ提取率分别为８３．３８％、９０．２３％、９６．７８％；人参皂苷Ｒｂ１提取率分别为７３．３４％、８０．１１％、９０．７１％。综合分析，说明湿法粉碎提取法艺效果最佳，超声水提法次之，回流提取法效果最差。本研究为工业化提取人参皂苷提供了新途径。 【关键词】人参皂苷Ｒｅ、Ｒｂ１；回流提取法；超声水提法；湿法粉碎提取法　　人参为五加科植物人参（ＰａｎａｘｇｉｎｓｅｎｇＣ．Ａ．Ｍｅｙ）的干燥根，别名山参、鬼盖、棒槌、土精、神草、棒槌等。是多年生草本植物，喜阴凉、湿润的气候。人参被人们称为“百草之王”，是闻名遐迩的“东北三宝”之一，历来是我国中医的名贵药材。味甘、微苦、微温，可补气、生津安神、增强免疫力。其主要活性成分为人参皂苷，目前为止共分离出３０余种，其中主要为人参皂苷Ｒａ１、Ｒａ２、Ｒａ３、Ｒｂ１、Ｒｂ２、Ｒｂ３、Ｒｃ、Ｒｄ、Ｒｅ、Ｒｆ、Ｒｇｌ、Ｒｇ２、Ｒｇ３、Ｒｈｌ等。人参皂苷提取方法较多， ４］、醇－吸附树脂法［５］和微波如浸渍法［１］、回流提取法［２］、超声波提取法［３－ 法［６］等。本文对回流提取法、超声水提法、湿法粉碎提取法进行了比较。 １　实验材料与仪器日本岛津ＬＣ－２０１０ＡＨＴ型高效液相色谱仪；天孚牌电子计数天平由金羊天平仪器公司生产；３Ｌ超声波提取器（上海超声波仪器厂）；高速组织捣碎机（上海标本模型厂）；１０１－３Ｃ型烘箱（上海实验仪器厂）；人参购于吉林市药材站；人参皂苷Ｒｅ和人参皂苷Ｒｂ１标准对照由中国药品生物制品检定所提供；甲醇为色谱纯；乙腈为色谱纯，其余试剂为分析纯。 ２　实验方法２．１　人参皂苷的提取方法２．１．１　超声水提法 参照文献［７］的方法，称取人参粉末４０ｇ，加定量水浸泡过夜，常温超声提取３次，超声时间每次４０ｍｉｎ，抽滤，合并滤液，上Ｄ１０１大孔吸附树脂柱，去除杂质，水洗脱至流出液为无色，再用８０％乙醇洗脱至洗脱液ＴＬＣ检查无皂苷反应为止，乙醇洗脱液减压回收至干，残渣即为人参皂苷粗品，定容至２００ｍｌ量瓶中，摇匀备用。 ２．１．２　湿法粉碎提取法 称取人参粉末４０ｇ，将人参粉末分别用６０％乙醇和７０％乙醇溶解，于１００００ｒ?ｍｉｎ－１高速粉碎提取２次，粉碎后药液于５０００ｒ?ｍｉｎ－１离心１０ｍｉｎ，取上清液，合并２次提取液，定容至２００ｍｌ量瓶中，摇匀备用。 ２．１．３　回流提取法 称取人参粉末４０ｇ，置于５００ｍｌ圆底烧瓶中，加入５０％甲醇溶液１００ｍｌ，回流提取４ｈ，用微孔滤膜（０．４５ｕｍ）滤过，滤液用５０％甲醇溶解转移至２００ｍｌ容量瓶中并定容至刻度。取滤液适量，１００００ｒ?ｍｉｎ－１离心１０ｍｉｎ，取上清液定容至２００ｍｌ量瓶中，摇匀备用。 ３　实验结果３．１　出膏率测定 从每份人参皂苷提取液中精确量取２０ｍｌ，置于蒸发皿中，先用水浴蒸干，后于１００℃干燥３ｈ，取出置于干燥箱中，３０ｍｉｎ后取出称重，计算出膏率。 ３．２　色谱条件 色谱柱：ＨｙｐｅｒｓｉｌＣ１８色谱柱（４．６ｍｍ×１５０ｍｍ，５ｕｍ）；流动相：水－乙腈； 梯度洗脱：０－４０ｍｉｎ：１８％－２９％乙腈，４０－６０ｍｉｎ：２９％－３５％乙腈，６０－６５ ｍｉｎ：３５％－１００％乙腈，６５－７０ｍｉｎ：１００％－１８％乙腈；流速为０．８ｍｌ?ｍｉｎ－１；进样量２０ｕｌ；柱温：室温；检测波长是２０５ｎｍ。 ３．２　对照品溶液的制备 分别精密称取人参皂苷Ｒｅ、Ｒｂ１对照品适量，加甲醇分别制成每１ｍｌ含人参皂苷０．４１ｍｇ，摇匀，作为对照品贮备液。 ３．３　供试品溶液的制备 精密称取上述各人参皂苷提取液１０ｍｌ，置蒸发皿中，水浴蒸干，残渣用适量甲醇溶解并用甲醇定容于１０ｍｌ量瓶中，摇匀，用微孔滤膜过滤，即得供试品溶液。分别吸取２０ｕｌ供试品溶液和对照品溶液注入液相色谱仪，计算各提取方法所得人参皂苷的提取率。结果回流提取法、超声水提法湿法、湿法粉碎提取法人参皂苷Ｒｅ提取率分别为８３．３８％、９０．２３％、９６．７８％；人参皂苷Ｒｂ１提取率分别为７３．３４％、８０．１１％、９０．７１％。 传统的人参皂苷提取多采用