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PAGE PAGE 9 江苏科技大学 大型仪器设备申购论证报告 设备名称： 申购部门： 负 责 人： 日 期： 激光共聚焦显微镜系统论证报告 一、设备购置的背景 2001年以来，在学校的正确领导和有关部门的大力支持下，蚕研所仪器设备得到了很大的改善和提高，促进了蚕研所科学研究和技术开发的进步，蚕桑功能基因的定位克隆、基因表达调控机理、胚胎形成与发育、蚕桑病原微生物分子生物学研究和生物技术开发等研究不断深入；发表论文的数量和质量明显提高，SCI收录论文由原来的每年2-4篇提高到8-10篇；研究生招生规模成倍增长，博士、硕士研究生达到40名/年，新增5个生物学二级学科；人才培养质量进一步提高，每年均有校优秀毕业生和优秀毕业论文获得者。 在后基因组时代，基因功能研究显得尤为重要，而细胞生物学以及发育生物学是研究基因功能的重要组成技术手段，也是基因功能研究验证必不可少的过程；同时病理学研究中该设备也是一个重要的研究手段。近年来，蚕研所在蚕桑功能基因、发育生物学以及病理学研究等方面取得了较大进展，但是由于受设备条件的限制，在细胞生物学研究方面只做到目的蛋白表达，不能对其进行精确定位。后基因组时代更关注蛋白昆虫生长发育中的作用机理、蛋白之间的相互作用等等。目前这方面的研究，由于设备的短缺只能在外单位开展，但由于实验样品的处理以及荧光时效性的限制导致实验不能顺利开展。 蚕研所在原有特种动物科学博士生、特种动物科学和生物化学与分子生物学硕士生、农业推广硕士生培养的基础上，今年开始拓展了5个生物学二级学科的硕士生培养工作。很多研究生的学位论文课题涉及分子生物学和细胞生物学研究。另一方面，蚕研所承担国家级科研项目，包括国家973、863、国家自然科学基金等，都需要开展细胞生物学等基础性研究。因此，急需要购置一个激光共聚焦显微镜系统。 二、设备购置的意义和必要性 1 意义 激光共聚焦显微镜的购置，是蚕桑及生物学研究生科研平台和专业能力实践基地建设项目的重要内容。激光共聚焦显微镜在细胞生物学、蛋白质相互作用等研究方面有独特的优势。它的购置必将进一步改善我校生命科学方面博士、硕士研究生培养质量，拓展生命科学研究领域，有利于保持和强化蚕究所作为蚕业科技国家队的地位与作用，提升我校基础研究和应用基础研究的科研水平，增强科研竞争力。 2 必要性 与传统光学显微镜相比，激光共聚焦显微镜具有更高的分辨率，实现多重荧光的同时观察并可形成清晰的三维图像等优点，在对生物样品的观察中，激光共聚焦显微镜有如下优越性。 （1）对活细胞和组织或细胞切片进行连续扫描，可获得精细的细胞骨架、染色体、细胞器和细胞膜系统的三维图像。 （2）可以得到比普通荧光显微镜更高对比度、高解析度图像、同时具有高灵敏度、杰出样品保护。 （3）多维图像的获得，如7维图像（XYZaλIt）：xyt 、xzt 和xt扫描，时间序列扫描旋转扫描、区域扫描、光谱扫描、同时方便进行图像处理。 （4）细胞内离子荧光标记，单标记或多标记，检测细胞内如PH和钠、钙、镁等离子浓度的比率测定及动态变化。 （5）荧光标记探头标记的活细胞或切片标本的活细胞生物物质，膜标记、免疫物质、免疫反应、受体或配体，核酸等观察；可以在同一张样品上进行同时多重物质标记，同时观察； （6）对细胞检测无损伤、精确、准确、可靠和优良重复性；数据图像可及时输出或长期储存。 （7）在细胞内水平分析验证不同蛋白质间的相互作用。 激光共聚焦显微镜是开展细胞生物学和分子生物学结合研究的重要工具。目前，全国拥有这类仪器的主要是生命科学研究单位以及生物制品公司，用于活细胞组织或生理病理切片等观察研究。 我校蚕研所和农业部重点实验室是国内较早开展家蚕细胞生物学以及分子生物学研究的单位，在家蚕遗传发育和生理病理等方面取得较好成绩，积极推动蚕桑业的发展。目前，家蚕研究已经进入后基因组时代，需要从细胞水平、蛋白水平研究家蚕基因功能，这就需要精密的仪器对蛋白进行实时定位观察，以及昆虫的活体三维观察，由于该方面仪器设备的不足，使得蚕研所在家蚕功能基因研究方面受到限制，影响了蚕研所在该领域的发展以及地位。国内蚕桑科研单位多数已经配有该仪器，所以该仪器的购置和使用，对提升我校特别是蚕研所和农业部重点实验室的设备条件、增强科技开发能力等，提高研究生培养质量，推进蚕研所在家蚕功能基因、遗传发育以及生理病理等方面研究，具有重要的作用。 三、可行性分析 1 前期工作基础 蚕研所与中科院上海生化所合作，在国内最早建立家蚕BmNPV表达系统，利用该系统成功表达十多个外源蛋白。同时，利用该系统开展病毒的功能基因研究，取得重要成果。蚕研所在细胞生物学研究方面有较好的研究基础，近年与中科院武汉病毒所合作，利用该系统成功对病毒的蛋白进行了定位分析，明确Bm21蛋白定位