新型冠状病毒的数字PCR检测方法及试剂盒发明专利.pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 111518959 A (43)申请公布日 2020.08.11 (21)申请号 202010504396.9 C12Q 1/6851(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (22)申请日 2020.06.05 C12R 1/93(2006.01) (71)申请人 上海市计量测试技术研究院 地址 201203 上海市浦东新区张衡路1500 号 申请人 上海交通大学　 中国科学院上海高等研究院 (72)发明人 梁文　杨雪　杨镇州　许丽　刘刚　 闻艳丽　李兰英　丁敏　樊春海　 左小磊　孙洁林　王丽华　 (74)专利代理机构 上海助之鑫知识产权代理有 限公司 31328 代理人 陈详 (51)Int.Cl. C12Q 1/70(2006.01) 权利要求书1页 说明书9页 序列表3页 附图4页 (54)发明名称 新型冠状病毒的数字PCR检测方法及试剂盒 (57)摘要 本发明提供了新型冠状病毒的数字PCR检测 方法及试剂盒，具体地本发明针对新型冠状病毒 ORF1ab基因和E基因设计了双重数字PCR检测体 系，实验结果表明本发明的双重数字PCR检测体 系具有极高的灵敏度和准确性。 A 9 5 9 8 1 5 1 1 1 N C CN 111518959 A 权　利　要　求　书 1/1页 1.一种用于检测新型冠状病毒核酸的引物对集，其特征在于，所述引物对集包括： 第一引物对，所述第一引物对包括如SEQ  ID NO.:1所示的正向引物；和，如SEQ  ID  NO.:2所示的反向引物。 2.如权利要求1所述的引物对集，其特征在于，所述引物对集还包括： 第二引物对，所述第二引物对组包括如SEQ  ID NO.:4所示的正向引物；和，如SEQ  ID  NO.:5所示的反向引物。 3.一种检测新型冠状病毒核酸的探针集，其特征在于，所述探针集包括：SEQ  ID NO.3 所示的第一探针。 4.如权利要求3所述的探针集，其特征在于，所述探针集还包括：SEQ  ID NO.6所示的第 二探针。 5.如权利要求4所述的探针集，其特征在于，所述第一探针的5’端包含有荧光报告基 团；所述第一探针的3’端包含有荧光淬灭基团； 所述第二探针的5’端包含有荧光报告基团；所述第二探针的3’端包含有荧光淬灭基 团。 并且，所述第一探针标记的荧光报告基团不同于所述第二探针标记的荧光报告基团。 6.一种用于检测新型冠状病毒核酸的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求1 所述的引物对集。 7.如权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括权利要求3所述的探针 集。 8.如权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括第一容器，所述第一容器 内包含引物探针混合液，所述引物探针混合液中包含SEQ  ID NO：1-6所示的多核苷酸序列。 9.一种检测新型冠状病毒核酸的方法，其特征在于，所述方法包括步骤：