蛋白质的化学修饰.pptVIP

SDS PAGE: Refolded vs Unfolded Reduced Oxidized Figure Inclusion bodies expressed in E.coli. 灌胶时要注意 催化剂不能加多了，加完催化剂要充分混匀，且立即灌胶， 灌胶时要保持小烧杯摇动，防止烧杯内的胶聚合。 灌胶动作要快，吸一满管的凝胶后，立即沿胶板的一角灌入，而且要防止气泡的产生。 样品预处理 取样品液与等体积样品缓冲液混合，100℃加热1～2分钟。 待浓缩胶聚合完全后，小心移出梳子，然后将胶板固定于电泳装置上，上下槽各加入电极缓冲液。加样 用微量进样器加样。每个样品孔加入20ul样品。同时加一个标准品。 【电泳】 在100 V的电压下电泳，当样品全部进入分离胶时，加大电压至100 V，当溴酚蓝达到胶底部，关闭电源。 【染色】 从电泳装置上卸下玻板，小心橇开玻板取出凝胶，放入染色液中染色30 min。 【脱色】 移出凝胶放入脱色液中脱色至本底无色为止。 【观察电泳结果】 根据标准样品，大致推测蛋白质的分子量。 用直尺分别量出标准蛋白质、待测蛋白质区带中心以及溴酚蓝前沿距分离胶顶端的距离，按下式计算相对迁移率（R）： 相对迁移率 = 样品迁移距