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文章如果有不当或者不妥的地方，请您联系我修改文章或者删除文章，文章来源于网络收集，如果有侵权的问题，请联系我沟通协调改正，非常感谢您！ 裸鼠成瘤专题知识讲座 裸鼠 无胸腺裸鼠（Nude Mouse, 简称裸鼠）。现在已成为医学生物学研究领域中不可缺乏 试验动物模型。尤其是在肿瘤学、免疫学、药品与生物制品 安全性评价及有效药品 筛选等试验方面, 它有着特殊 价值。 裸鼠（纯合子nu/nu突变鼠）关键表现为无毛（但可看到一个细毛组织学证实有被毛滤泡）以及缺乏正常胸腺。杂合子小鼠（nn/+）各方面表现都正常。 小鼠中有若干突变基因, 它可产生一个为无毛 表现型（phenotype）, 比如无胸腺裸鼠（Nude）、裸鼠（Naked）、无毛鼠（Hairless）、无鼻毛鼠（Rhinol）, 不要把这些突变鼠基因相互混淆。裸鼠 唯一特征是胸腺缺点表现型, 所以, 不能将“裸鼠”与“无毛鼠”两词交换使用。 裸鼠 裸小鼠 裸大鼠 裸小鼠(基因符号nu): 无毛(hair less),无胸腺(athymus).幼鼠(3－4周龄),成年鼠(6－8周龄。 抵御力差, 易在SPF环境下可生存, 所用 笼具、垫料、饲料、 饮水患病毒性肝炎和肺炎, 所以喂养和繁殖要求条件比较严格, 等都要求经过严密灭菌消毒并采取隔离器喂养, 以确保长久存活并进行繁殖。 裸大鼠(基因符号rnu ): 通常特征似裸小鼠, 但躯干部仍有稀少被毛并非象裸小鼠那样完全无毛, 头部及四肢毛更多。裸大鼠易患呼吸道疾病。 形态特征 即使说以裸大鼠替换裸小鼠, 含有移植肿瘤大, 取血量多, 可行部分外科小手术等优点。所以比裸小鼠有一定优越性, 其缺点是维持经费比裸SPF小鼠更高, 另外裸大鼠现在不怎么流行。所以我们试验室常见 是BALB/c-nu裸小鼠。 伴随裸小鼠年纪增加或相关原因 影响(如病毒感染),裸鼠体内正常T细胞会增加, 故接种肿瘤试验通常采取4--6周龄 裸鼠。 裸鼠 选择 1.人体原发癌 我们试验室均采取细胞株作为材料, 这个方法是 性价比最高 , 操作简便, 材料安全且轻易获取。 结肠癌、乳腺癌、肺癌、卵巢癌、黑色素瘤 、淋巴瘤、白血病、肾癌、宫颈癌、软组织 肉瘤和骨肉瘤等移植于裸鼠、取得了一定百 分比（35.7%） 良好生长, 并可传代。 裸鼠成瘤 2.建株 人体肿瘤组织培养细胞 裸鼠成瘤方法 理论上建株 肿瘤细胞均能够 细胞 选择大致有一下多个方面: 1.国际公认度较高 细胞株。 2.依据体内生长情况来确定, 很多细胞株, 在文件中有 很高 出镜率, 不过实际上, 基础都是从体外开始有名。? 细胞株 选择 当然, 我们对于细胞株 选择是没有选择 ! 常规较轻易成瘤 细胞: Hep-G2（肝癌, Hep2（喉癌）, NCI-H460(大细胞肺), A431(表皮癌),SK-OV-3（卵巢癌）, MCF-7（乳腺癌）, A375/B16-F10（人黑色素瘤细胞）。 能够成瘤不过比较慢 细胞: CNE（鼻咽癌）, A549（肺癌）, SPC-A-1（肺腺癌）。HT-29（结肠癌）, EL-7402（肝癌）。 部分比较有争议 细胞: Hela（宫颈癌）, HCT（人回盲肠癌细胞/人结直肠癌腺癌细胞）。 常见 细胞株 1、慢病毒保留 理论上慢病毒可在-80℃保留6个月, 在4℃可保留3天。因为 慢病毒每次冻融会降低病毒滴度10%, 所以慢病毒试验最好 是提前分装。 2、MOI值 细胞感染达成80%以上所需MOI值, 这个大部分细胞是能够 查到, 不过因为因为慢病毒感染细胞是很灵活 , 所以MOI 值 选择也是很有差异性 , 具体情况具体分析。 细胞慢病毒感染 附: 慢病毒使用量 相关计算公式 MOI=（慢病毒使用 体积*慢病毒滴度）/ 需要感染 细胞数 其中: 慢病毒使用体积单位为ml 慢病毒滴度单位为TU/ml 比如: Hep-G2细胞, MOI=20, 慢病毒滴度=1.0*108 TU/ml, 24孔板 细胞总数: 2.0*105个。 所以: 感染24孔板中1孔 HEP-G2细胞所需要 慢病毒体积为: (20* 2.0*105)/ 1.0*108 =0.04ml 细胞慢病毒感染 附: 部分细胞 慢病毒感染效果图 K562 A549 细胞慢病毒感染 细胞培养: 细胞 状态以及数量是裸鼠皮下成瘤很关键 一步。细胞状态良好, 对数生长