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化妆品有限公司沉降菌检测作业规程  文件编号 RY-SOP-PG-91 版 次 A/0 页 码 第1页共3页 1、目的 规范洁净区和洁净室沉降菌测试条件和测试方法。 2、适用范围 适用于公司洁净区、洁净室或局部空气净化区域（如：洁净工作台）的沉降菌的测试和环境验证。 3、引用文件 化妆品卫生规范 -2007 GB/T 16294-2010 医药工业洁净室（区）沉降菌的测试方法 4、定义 4.1 沉降菌：用本测试规定的方法收集空气中的活微生物粒子，通过专门的培养基，在适宜的生长条件 下繁殖的可见菌落数。 4.2 沉降菌菌落数：规定时间内每个平板培养皿收集到空气中沉降菌的数目，以（个 /皿）表示 5、仪器和设备 5.1 灭菌培养皿 90mm *15mm 5.2 培养基。 5.3 恒温培养箱。 5.4 高压灭菌器。 5.5 放大镜 6、培养基和试剂 6.1 生理盐水： 成份﹕氯化钠 8.5g 蒸馏水加至 1000ml 制法﹕溶解后﹐分装到加玻璃珠的三角瓶内﹐每瓶 90ml﹐121℃（15 1b）2 0 min，高压灭菌。 6.2 卵磷脂、吐温 80—营养琼脂培养基 6.2.1 成分： 蛋白胨 20g 牛肉膏 3g 作成 审核 批准 日期 日期 日期 File Name Page 2 of 3 : 沉降菌检测操作规程 氯化钠 5g 琼脂 15g 卵磷脂 1g 吐温 80 7g 蒸馏水 1000mL 制法：先将卵磷脂加到少量蒸馏水中，加热溶解，加入吐温 80，将其他成分（除琼脂外） 加到 其余的蒸馏水中， 溶解。 加入已溶解的卵磷脂、 ? 吐温 80， 混匀， 调 pH 值为 7.1～ 7.4，加 入琼脂， 103.43kPa（ 121℃ 15 lb） 20min 高压灭菌，储存于冷暗处备用。 7、操作步骤 7.1 取样： 取样点的设置： A) 最少取样点数：灌装间、制造间 3 个，其他洁净区 2 个； B) 取样点的位置：取样点应均匀分布在待测试区域内，一般离地高度为 0.8m 左右，关键设备处 可增加取样点； C）每个取样点一般取样一次，每次一般为 2 个取样皿； D) 布置采样点时，应避免回风口； 取样时间：可采用动态取样和静态取样： A) 动态取样：正常生产，且空气净化系统正常运转 30 分钟后开始取样； B）静态取样：员工己撤离生产区域，且空气净化系统正常运转至少 20 分钟后；静态取样时人员 不得多于 2 人； 取样 ）将制备好的培养皿逐个放置到采样点，然后从里到外逐个打开培养皿盖，使培养皿暴露在空气中； B）静态测试时，培养皿的暴露时间为 30 分钟以上；动态测试时，培养皿的暴露时间不得大于 4 个小时 7.2 置于 37± 1℃恒温培养箱内培养至少 48 小时，记录每个平皿的菌落数； 8、菌落计数方法： 8.1 先用肉眼观察，点数菌落数，然后再用放大 5 倍～ 10 倍的放大镜检查，以防遗漏； 每个测点的沉降菌总数为该测点所有培养皿菌落数的平均数； 9、结果评定： 9.1 每个测点的菌落数必需低于该洁净区的标准时判定符合要求； 9.2 静态测试时，如某测点的的菌落平均数超过标准，应再重新取样两次，两次都低于标准时才能判 File Name: 沉降菌检测操作规程 Page 3 of 3 定符合；。 10、日常监控 当出现以下情况时，应额外增加检测频次： 长时间停工区域，预期开始使用时； 净化区域内发现有污染存在时； 在生产期间，空气净化系统进行任何重大的维修时； 当洁净室（区）结构或区域分布有重大变动时； 当生产设备有重大维修或增加设备时； 日常操作记录反映出倾向性数据时。 附表