研究生毕业论文二逆转肿瘤多药耐药的作用及机制研究.docVIP

摘要 多药耐药的产生是癌症化疗失败的主要原因之一 ABCB1 和ABCG2在介导多药耐药产生过程中起着重要作用 1 前期MTT对17种新合成化合物的逆转耐药活性进行检测，筛选出活性较好的LS-2-3J 2 利用细胞稳定转染技术，构建ABCG2过表达的多药耐药细胞株MCF-7/ABCG2和293T/ABCG2,并通过WB检测ABCG2表达水平 3 采用MTT法检测化合物LS对各种细胞的细胞毒性 结果发现对正常细胞毒性小于肿瘤细胞 4 选出LS对上述细胞株的细胞存活率大于80%的化合物浓度 5 采用MTT法检测LS在不同浓度下对多药耐药细胞的逆转耐药倍数。 结果表明LS能显著提高ABCB1或ABCG2过表达多药耐药细胞对化疗药物的敏感性 多柔比星 米托蒽醌 1 流式细胞术检测DOX和MITX在ABCB1过表达细胞K5562/A02和ABCG2过表达细胞MCF-7/ABCG2中的积累和外排水平。 结果显示细胞中积累量显著提高，抑制外排。对亲本细胞没有明显的积累和外排。 2 检测LS对ABCB1和ABCG2蛋白ATP酶活性的抑制作用。 结果显示LS能够抑制两种蛋白ATP酶的活性。 3 采用WB RT-PCR技术，得出LS能够显著下调细胞内ABCB1和ABCG2mRNA及蛋白的表达水平。 结论 LS有很强的逆转耐药作用，其机制是靶向和抑制耐药泵的功能与表达，一方面能够抑制ABCB1和ABCG2蛋白ATP酶的活性，而增加细胞内的药物积累，而增强耐药细胞对药物的敏感性。 另一方面，LS能下调ABCB1和ABCG2蛋白和mRNA的表达水平 所以，LS具有逆转肿瘤耐药的作用。