动物组织DNA的提取.ppt

Total DNA extraction from eukaryotic tissue ;实验目的;DNA提取原则;实验试剂和仪器; 实验原理 动物组织细胞中的核糖核酸(RNA)与脱氧核糖核酸(DNA)大部分与蛋白质结合形成核蛋白。RNA核蛋白和DNA核蛋白在不同浓度氯化钠溶液中的溶解度有显著区别。DNA核蛋白在0.14 mol/L 氯化钠中溶解度低，但在 1 – 2 mol/L氯化钠中溶解度高；RNA核蛋白在0.14 mol/L氯化钠中仍有相当大的溶解度。所以调节氯化钠浓度，可使RNA核蛋白和DNA核蛋白分步提取。;氯仿-异戊醇溶液可以使核蛋白变性沉淀，将核酸物质萃取出来；再向萃取液中??入适量乙醇，可使DNA析出。 氯仿异戊醇抽提和乙醇沉淀方法在DNA纯化研究中非常常用，氯仿-异戊醇抽提的原理是，氯仿可使蛋白质变性并加速有机相与液相分层；异戊醇有助于消除抽提过程中产生的气泡。而DNA不溶于乙醇等有机溶剂，因此可以通过乙醇沉淀来纯化和浓缩DNA。 ; 所以动物细胞中DNA提取一般有以下几步: 首先是机械法破细胞抽提； 然后去除蛋白质，糖类等细胞内杂质污染； 最后纯化出ＤＮＡ。;实验步骤;结果分析与讨论 记录DNA提取过程中的现象，结合原理进行分析