细菌鉴定之生化反应 .pptxVIP

细菌鉴定之生化反应常用试验碳水化合物的代谢试验蛋白质和氨基酸的代谢试验碳源和氮源利用试验各种酶类试验抑菌试验一 碳水化合物的代谢试验1 糖(醇、苷)类发酵试验原理:细菌含有发酵糖(醇、苷)的酶分解糖类产酸、产气、或仅产酸 培养基:含有0、5%~1%的糖(醇、苷)的液体、半固体、固体、或 微量生化管方法: 纯菌种接种培养基,要求的温度,数小时至两周,微量管注意保持湿润,以免干燥结果:能分解糖(醇、苷)类产酸时,培养基中的指示剂呈酸性反应 若能产气时,培养基可出现开裂气泡等现象意义:肠杆菌科尤为重要2 氧化-发酵试验(O/F)原理:细菌分解葡萄糖的过程中,必须有分子氧参加的,称为氧化型;能够进行无氧降解的,称为发酵型;不分解葡萄糖的称为产碱型培养基:HL二氏培养基方法;待测菌同时接种两只HL培养基,其中一只滴加无菌的液体石蜡,高度不少于1cm,35℃培养48h或更长结果:两只均无变化为产碱型;两只均产酸为发酵型;仅不加石蜡的产酸为氧化型意义:肠杆菌科与非发酵菌的鉴别;葡萄球菌与微球菌的鉴别,前者为发酵型,后者为氧化型3 ONPG(β半乳糖苷酶试验)原理:有的细菌能够产生β半乳糖苷酶,分解邻-硝基酚- β半乳糖苷生成黄色的邻-硝基酚方法:从KIA上取菌,于0、25ML无菌生理盐水中制菌悬液,加甲苯一滴,使酶释放。37 ℃水浴5min,加0、25mlONPG试剂,水浴20min