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- 2021-11-13 发布于北京
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LOGO 2种孔径的凝胶、2种缓冲体系、3种pH值使不连续体系形成了凝胶孔径、pH值、缓冲液离子成分的不连续性,这是样品浓缩的主要因素。 另外,浓缩胶还具有比分离胶更低的pH。浓缩胶内的缓冲溶液是Tris-HCl(pH 6.8),该pH远低于Tris的pK值(8.1)。分离胶内的缓冲溶液是pH 8.8的Tris-HCl,而电泳正负两极的缓冲溶液均为pH 8.3的Tris-甘氨酸缓冲溶液。在浓缩胶中,小分子并带有大量负电荷的Cl-在凝胶中的移动速率较快,而电荷较少且分子量较大的甘氨酸的移动速率较慢。由于二者在同一电场中,具有相同的电流,由此形成的电压梯度导致甘氨酸离子始终跟随在Cl-的后面,带有负电荷的蛋白质样品则浓缩在甘氨酸离子和Cl-之间向正极移动。当样品进入pH 8.9的分离胶时,甘氨酸的解离度增加,在电场中的迁移率高于样品,蛋白质不再夹于两种离子之间向正极移动,这时的蛋白质依靠分子筛效应和电荷效应进行分离。 LOGO 文章如果有不当或者不妥的地方,请您联系我修改文章或者删除文章,文章来源于网络收集,如果有侵权的问题,请联系我沟通协调改正,非常感谢您! SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分离大肠杆菌全蛋白 Your site here LOGO 试验目 学习SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳基础原理; 掌握SDS-聚丙烯酰胺凝胶分离蛋白质操作技术(基础性很强, 使用范围广泛); 学
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