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文章如果有不当或者不妥的地方,请您联系我修改文章或者删除文章,文章来源于网络收集,如果有侵权的问题,请联系我沟通协调改正,非常感谢您! 一些试剂对四膜虫影响的观察 一、试验目 1、了解生存环境对生命关键意义。 2、比较多种原因对四膜虫细胞影响。 二、试验原理 细胞生存需要一定条件。四膜虫也不例外。其形态比较固定, 细胞较大, 它纤毛和伸缩泡及其本身都在不停运动。一旦条件发生改变, 四膜虫所发生反应立即就能够被观察到。 本试验经过部分常见化学试剂, 以不一样浓度对四膜虫进行处理, 观察较短时间内细胞所产生效应。 1、酸和碱 每种生物对环境酸碱度都有一定影响, 水生生物(包含四膜虫)和培养组织细胞更是如此。酸碱度超出一定程度, 对细胞生存不利, 甚至会将其杀死! 深海海水酸碱度约为pH8左右。大面积淡水水域酸碱度也较稳定, 约在pH6~9之间。海洋和湖泊等水域有较强调整pH能力。这是因为水域中存在着H2CO3和碳酸盐缓冲系统。即使局部地域发生了pH改变, 在一定范围内经过一定时间也能经过这一缓冲系统而恢复正常。不过假如环境污染(酸雨、废酸排放)超出了水域调整能力, 水域pH就要发生改变, 生物生存和发育就要受到影响。酸碱度改变对生物生长生殖和活动都能发生影响。比如, 绿草履虫(Paramecium barsaria), 在酸性培养液中(pH6.0~6.3), 体长可达120μm, 在碱性培养液中(pH7.6~8.0), 体长只有86μm。海胆卵在pH6.2水中不能受精, pH低于4.6时死亡。多种微生物都有其最适酸碱度。酵母和霉菌适宜在微酸性环境中。也有少数能够在强酸或强碱性环境中生存。 氧化剂可使蛋白质变性, 破坏生物膜结构, 在浓度较高时能快速杀死细胞。常见消毒剂如次氯酸钠、双氧水都是强氧化剂。 强氧化剂杀菌作用: 强氧化剂轻易同细菌细胞壁中脂蛋白或细胞膜中磷脂质、蛋白质发生化学反应, 从而使细菌细胞壁和细胞膜受到破坏(即所谓溶菌作用), 细胞膜通透性增加, 且氧化剂快速扩散进入细胞内, 氧化了细胞内酶或RNA、DNA, 从而致死菌原体。 巯基乙醇是常见还原剂, 微量巯基乙醇可预防一些生物活性物质活性基团及酶活性中心受到破坏。 巯基试剂在生化反应中有两个用途, 一是预防蛋白质或酶等分子中SH-基氧化成S-S, 二是一些酶反应中维持体系还原环境。常常应用巯基试剂有二硫丁醇类化合物(如二硫苏糖醇DTT、二硫赤酰糖醇DTE)和2-巯基乙醇, 谷胱甘肽也常常应用。 巯基乙醇有毒! 对环境有危害, 对水体可造成污染 。 2、氧化剂和还原剂 去垢剂是部分含有亲水极性基团和疏水非极性基团长链分子。非离子型去垢剂如TritonX-100可与脂双层形成混合微团, 它们关键与蛋白质疏水部位相互作用, 通常不会引发蛋白质变性。而离子型去垢剂与蛋白结合后可改变蛋白质结构, 使之变性, 尤其是加热后可使蛋白质解离为单体, 如十二烷基磺酸钠(SDS)等。 3、去垢剂 去垢剂能破坏细胞膜结构, 造成细胞损伤、功效丧失, 甚至引发死亡。非离子型去垢剂经过溶解膜上脂蛋白和磷脂类化合物等, 使细胞膜结构改变。 4、高渗溶液 渗液压对细胞影响: 水经过细胞膜运动方向关键决定于细胞外环境渗透压。在正常情况下细胞外渗透压与细胞内渗透压处于平衡状态, 细胞维持正常形态与生理功效。高渗液可使细胞失水, 引发细胞形态/功效改变; 低渗液可使细胞膨胀, 甚至破裂。 细胞膜含有对物质选择透过生理功效。脂溶性越高通透性越大, 水溶性越高通透性越小; 非极性分子比极性轻易透过, 小分子比大分子轻易透过。水分子可经过水通道进出细胞膜; 非极性小分子如O2、CO2、N2能够很快透过脂双层, 不带电荷极性小分子, 如尿素、甘油等也能够透过人工脂双层, 尽管速度较慢, 分子量略大一点葡萄糖、蔗糖则极难透过, 而膜对带电荷物质如: H+、Na+、K+、Cl—、HCO3—是高度不通透。 不一样分子透过人工脂双层能力 水通道是处于连续开放状态膜通道蛋白, 水分子转运不需消耗能量, 也不受门控机制影响。水分子经过水通道移动方向完全由膜两侧渗透压差决定, 水分子从渗透压低一侧向渗透压高一侧移动, 直到两侧渗透压达成平衡。 第一个被发觉水通道蛋白APO1 (引自/) 四膜虫为淡水性原生生物, 有伸缩泡来调整渗透平衡, 耐低渗, 但高渗对其有影响! 可注意观察在不一样浓度蔗糖和NaCl溶液中细胞发生改变! 5、有毒物质 叠氮钠: 剧毒, 可强烈地抑制并阻断线粒体中细胞色素电子运输系统。
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