zn和金属硫蛋白在细胞内表达的关系.ppt

Zn和金属硫蛋白在细胞内表达的关系;MRE: 金属反应元件 MT : 金属硫蛋白 apo-MT:金属硫蛋白前体物 SH : 巯基 NLS: 核定位序列 PKC: 蛋白激酶C MTF-1 :金属转录因子 apo-MTF-1:无活性金属转录因子 JNK: c-Jun氮端激酶 -TGCRCNC-: MRE关键区域共有序列;;一﹑序言;;研究对象;二﹑MT结构;MT通常是由60一68个氨基酸残基组成多肽单链．分子中含有大量巯基, 但不存在二硫键, 在自然条件下, 全部巯基均与金属离子结合（Binz等, 1999）． ;MT空间结构;MT分子中没有α-螺旋和β-折叠肽段, 一分子MT能够结合7个Zn或Cd(Michalska等, 1996）。在MT分子中, 每三个硫基与一个金属离子形成复合物（Hamor , 1986)。; 三、Zn2+和MT在细胞内表示;研究对象;（资料来源：Jayasurya等,2000）;研究表明: 细胞中加入外源性诱导剂, 如NO,H2O2, 重金属离子也会引发MT表示, 而这种诱导都是经过释放MT中Zn2+实现。;图8 外源性NO供体提供的NO与Zn2+均引起MT-1,MT-2的mRNA的表达;（资料来源：Kroncke, 1994);图10 G75凝胶色谱仪分析老鼠肝脏上皮细胞胞质溶胶中加入Zn2+以及Zn2++DETA/NO后的MT中Zn2+变化;图11 H2O2诱导人的色素上皮细胞MT的表达;图13 胞内铜浓度的改变对MT-1mRNA水平的影响;表明Cu2+,Cd2+诱导MT表示, 也是经过置换其中Zn2+引发。;细胞中Zn2+是怎样诱导MT在胞内表示呢？;四、Zn2+介导MT在细胞内表示机制;MTF-1是结合在MREs功效区域发挥其作用（Koizumi, 1999）;（资料来源：Smirnova, 2001）;图17 老鼠体内MTF-1的激活仅仅是Zn2+的作用;老鼠MTF-1蛋白由675个氨基酸组成, 包含一个含有6个Cys2-His2锌指DNA结合区域（图b)和三个转录激活区域(图c)（Radtke等, 1993）, 以及假定核定位序列（NLS）和核输出序列（NES)(图a,c)(Saydam, 2001) ;图20 MTF-1的锌指无序性;图21 MTF-1锌指缺失后与DNA结合的活性;图24 缺失锌指F1，F5-6， MTF-1,短暂转染果蝇SL2细胞后的功能;资料来源：（Apuy等， 2001）;（资料来源：Chen等，1998）;（资料来源：Stitt等，2006);（资料来源：Saydam等，2001);图32 老鼠纤维母细胞锌处理MTF-1的锌指F1缺失之后的核质MTF-1变化;图33 人的MTF-1的锌指F1-F3足够引起丙酮酸激酶（myc-pk)的核定位;图34 人的MTF-1的氨基酸133-226序列是其核定位必须的;资料起源: ???Saydam, 2001）;MTF-1活性可能和其磷酸化相关（Bittel, 1998）, 其磷酸化发生在核转运过程中（Saydam, 2002), Zn2+能够诱导MTF-1磷酸化（Adams, 2000）;（资料来源：Saydam，2002）;图39 金属离子激活老鼠L细胞的JNK和PKC;(资料来源：Saydam等，2001）;表明: MTF-1磷酸化是MT表示所必需, 其可能与Zn2+诱导MT-1表示过程中PKC,JNK等多个酶激活相关, 而Zn2+是经过刺激MTF-1信号转导路径中这多个激酶, 最终引发MT基因表示。;（资料来源： Saydam等，2001）;六﹑结语;1.外源性添加Zn2+能够诱导细胞内MT表示。 2.外源性诱导剂NO, H2O2以及重金属离子诱导MT在细 胞内表示依靠于MT中Zn2+作用。 3.Zn2+诱导MT在细胞内表示分为三个过程: 第一, Zn2+与MTF-1锌指结合; 第二, Zn2+经过PKC等 多个酶诱导MTF-1磷酸化; 第三, Zn2+介导活性 MTF-1进入细胞核, 最终活性MTF-1与MRE结合, 开启 MT转录发生。;七, 参考文件;Aravindakumar,C.T.,Ceulemans,J.,De Ley,M.,1999.Nitric oxide induces Zn2+ release from metallothionein by destroying zinc-sulphur clusters without concomitant formation of S-nit