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;课题目标:
1、说出固定化酶和固定化细胞的原理;
2、尝试制备固定化酵母细胞,并利用固定化酵母细胞进行酒精发酵。
课题重难点:制备固定化酵母细胞。;温故知新:;酶制剂的优点:
催化效率高、低耗能、低污染,大规模地应用于食品、化工等各个领域。;酶制剂存在的缺陷:
1、通常对强酸、强碱、高温和有机溶剂等条件非常敏感,容易失活
2、溶液中的酶很难回收,不能被再次利用,提高了生产成本;
3、反应后会混在产物中,可能影响产品质量。;固定化酶技术和固定化细胞技???;一、基础知识:;1、生产高果糖浆的方法是?;2、生产高果糖浆需要什么酶?其作用是什么?这种酶有何特点?;3、固定化酶技术生产高果糖浆的过程:;4、这种方法的优点是什么?; 在生产实际中使用固定化酶技术的不足:;(二)、固定化细胞技术;2.将酶或细胞固定化的方法;酶和细胞固定方法的选择;3、固定化细胞常用的载体; 从操作角度来考虑,你认为哪种方法更容易?; 活化是指让处于休眠状态的微生物重新恢复正常生活状态的过程。;(2)配制CaCl2溶液:
0.83gCaCl2+150mL蒸馏水 →200mL烧杯→溶解备用。;(3)配制海藻酸钠溶液:
0.7g海藻酸+10mL水→50mL烧杯→酒精灯微火(或间断)加热,并不断搅拌,使之溶化→蒸馏水定容到10mL。;(4)海藻酸钠溶液与酵母细胞的混合:
将溶化的海藻酸钠溶液冷却至室温,加入活化酵母细胞液,搅拌后吸入到注射器中。;(5)固定化酵母细胞:
以恒定速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到CaCl2溶液中,形成凝胶珠状颗粒。; 刚形成的凝胶珠应在CaCl2溶液中浸泡一段时间,以便形成稳定的结构。
检验凝胶珠的质量是否合格,可以使用下列方法:
一是用镊子夹起一个凝胶珠放在实验桌上用手挤压,如果凝胶珠不容易破裂,没有液体流出,就表明凝胶珠的制作成功。
二是在实验桌上用力摔打凝胶珠,如果凝胶珠很容易弹起,也能表明制备的凝胶珠是成功的。;这一阶段成功与否呢?怎样评价?;(6)冲洗:将固定的酵母细胞凝胶珠用蒸馏水冲洗2~3次。
(7)发酵:150mL10%葡萄糖+固定化酵母细胞→200mL锥形瓶→密封→25℃发酵24h。
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