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专题四:酶的研究与应用
课题三;; 什么是固定化酶?;1、固定化酶技术生产高果糖浆的图示:;2、固定化酶技术的优点和缺点;二、固定化细胞技术;2、方法; 酶和细胞固定方法的选择;3、固定化细胞技术的优点和缺点;4、固定化细胞常用的载体;三、实验操作
1.制备固定化酵母细胞
( 1)酵母细胞的活化:
1g干酵母+10mL蒸馏水→50mL烧杯→搅拌均匀→放置1h,使之活化。
〖思考〗活化是指什么?
(2)配制CaCl2溶液:
0.83gCaCl2+150mL蒸馏水→200mL烧杯→充分溶解备用。;(3)配制海藻酸钠溶液:
0.7g海藻酸钠+10mL水→50mL烧杯→酒精灯微火(或间断)加热,并不断搅拌,直至溶化→蒸馏水定容到10mL。
〖思考〗微火加热并不断搅拌的目的是什么?
(4)海藻酸钠溶液与酵母细胞的混合:
将溶化的海藻酸钠溶液冷却至室温,加入活化酵母细胞液,搅拌后吸入到注射器中。
;〖思考〗为什么要等到海藻酸钠溶液冷却后才能加入酵母细胞呢?
(5)固定化酵母细胞:
以恒定的速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到CaCl2溶液中并浸泡30min,形成凝胶珠状颗粒。
〖思考〗 CaCl2溶液所起的作用是什么?;2、固定化酵母细胞的发酵
(6)冲洗:将固定的酵母细胞凝胶珠用蒸馏水冲洗2~3次。
(7)发酵:150mL10%葡萄糖+固定化酵母细胞→200mL锥形瓶→密封→25℃发酵24h。
;〖思考〗发酵过程中锥形瓶为什么要密封?
〖思考〗锥形瓶中的气泡和酒精是怎样形成的?
〖思考〗在利用固定化酶或固定化细胞进行工业生产的过程中,需要无菌操作吗?
; 练习答案:
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