聚酮合酶PPT课件.ppt

聚酮化合物（polyketides）PKS; PKS是由细菌、放线菌、真菌或植物产生的一大类天然产物，包括大环内酯类、四环素类、蒽环类、聚醚类等化合物。 这些天然产物具有抗感染、抗真菌、抗肿瘤、免疫抑制等活性。 ; 红霉素（erythromycin）、 利福霉素（rifamycin）、 四环素（tetracycline）、 两性霉素（amphotericin） 等用作抗生素 ； 多柔比星（doxorubicin）、 埃博霉素（epothilone）、 光辉霉素（mithramycin）、 等用作抗肿瘤药物； ;尽管聚酮化合物的化学结构不同，但其 生物合成机制基本相似.;PKS 的各种活性分别由 其蛋白质组成模块来完成， ;PKSⅠ ;Ⅰ型聚酮合酶一般是由呈线性排列 并共价结合的几个结构域组成的多功能蛋白;Ⅰ型聚酮合酶的各个功能单元呈线性排列;Ⅰ型聚酮合酶首先由 ACP 将乙酰辅酶A 活化的 起始单位或延伸单位作为底物， （乙酸、丙二酸和丁酸等多种简单羧酸） ;属于PKSⅠ的聚酮产物包括雷帕霉素、红霉素、 利福霉素、阿维菌素、洛伐他汀和埃博霉素;PKS Ⅱ ;Ⅱ型聚酮化合物的碳骨架部分是由最小迭代用酶 （minimal PKS）催化的 minimal PKS 由 2 个酮酰合酶单元组成的 异源二聚体（KSα和KSβ）和1 个 ACP 构成（图 C）。 ;乙酰辅酶A 通常作为Ⅱ型聚酮化合物的起始单位， 丙二酰辅酶A 则作为延伸单位。 ;PKSⅢ Ⅲ型聚酮合酶是一种重复使用的亚基分子大小为 40×10^3~47×10^3的同源二聚体自主式合酶 （图D），能直接催化泛酞辅酶A间的缩合， 形成单环或双环芳香类聚酮化合物。;Ⅲ型聚酮合酶广泛存在于植物、 细菌中，甚至真菌中也存在。;CHS 以 4-香豆酰-CoA为起始单元， 3 分子丙二酸-CoA 作为底物， 连续完成3 步脱羧醇醛缩合， ;与Ⅰ、Ⅱ型聚酮合酶相比;聚酮化合物的异源表达 ;2.1大环内酯类 ;2.2四环素类 ;2.3蒽环类 ;2.4聚醚类 ;3异源表达宿主 ;一些主要聚酮类化合物 合成途径;参与土曲霉洛伐他汀合成途径的酶包括: 两个多聚乙酰合成酶洛伐他汀二酮体合成酶 （lovastatin diketone synthetase，LDKS) 和洛伐他汀九酮体合成酶 （lovastatin nonaketide synthetaseLNKS) 〔分别由lovB和lovF基因编码)、转酯酶 〔由lovD基因编码)、烯酯酰还原酶 〔由lovC基因编码)和P450单加氧酶〔由lovA基因编码) 其具体合成途径如图1所示。 LNKS和LDKS均含有 酮合成酶（ketosynthase ， KS)、 酞基转移酶（acyltransfarase ，AT)、 酮还原酶（ketoreductase ，KR）、 脱水酶（dehydratase，DH) , 酞基载体蛋白(acyl carrier protein ， ACP) 及甲基转移酶(methyltransferase，MeT)功能域， 并分别参与合成洛伐他汀九酮主体和二酮侧链， 再由lovD编码的转酯酶将二者连接起来合成洛伐他汀;红曲色素广泛应用于腌制品和肉制品的着色防腐，具有保健功效和药用价值，在世界各地都有巨大的市场，在东南亚国家的应用尤为广泛. G;在过去几十年中，聚酮化合物的开发大多采用筛选环境微生物活性的传统方法，其流程包括微生物分离纯化、大量培养、培养物收集、目标化合物抽提、鉴定及开发利用。但通过这种方法化合物重复发现的概率极高，且由于培养基配方引起活性次级代谢产物产量低下或者靶点局限造成漏筛的现象十分普遍。 于是，人们通过基因定向筛选从自然界中获得产生目标活性化合物的菌种资源，并对不需要的重复的化合物产生菌进行早期鉴别和定向剔除，既可节省大量的精制、结构解析和分析时间，又能节约经费，大大提高工作效率。 ;细菌是大量聚酮类、非核糖体肽类、萜类、黄酮类化合物的重要来源，发酵是获得这些化合物的重要手段之一。通过原始菌株生产天然产物最大的挑战是从微生物中分离原始菌株。许多产生天然产物的微生物不能从土壤中分离出来，原因是99%的微生物离开它们自然的环境就不能生长。因此，异源表达将解决这样的问题。;The End