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微柱凝胶介质交叉配血试验;试验原理
将供血者、受血者红细胞和血浆(清)分别按照交叉配血的试验要求加入到含有抗人球蛋白试剂的微柱凝胶柱主侧和次侧管的反应室中,置37℃孵育器中孵育一定时间,如果血浆(清) 中存在有针对红细胞抗原的IgG或IgM型血型抗体,经孵育和离心后红细胞将发生凝集,并形成红细胞凝集团块。; 凝胶柱中的凝胶具有分子筛的作用,从而阻止凝集的红细胞下沉,而留在微柱的表面。如血清中不含有针对红细胞抗原的抗体,经过孵育、离心后,红细胞仍以单个分散细胞形式存在,经离心力作用顺利通过凝胶分子筛,下沉到微柱管的底部而形成红细胞扣。
;;标本、试剂与器材
1、标本 采用2人ABO同型的EDTA抗凝血各3ml。
2、试剂 用于交叉配血试验的抗人球蛋白微柱凝胶试验卡,红细胞稀释液。
3、器材 移液器、试管架、37℃专用孵育器(微柱凝胶试验卡)、专用离心机(微柱凝胶试验卡)
;操作步骤
1.离心受血者、供血者血液标本,使血浆和红细胞分离,用生理盐水洗涤受血者红细胞3次,再用凝胶卡配套的红细胞稀释液配成1%红细胞悬液。
;2.取出交叉配血试验的微住凝胶抗人球卡并标记好主侧和次侧孔,撕去铝箔纸,垂直放置卡槽内。;3.主侧孔内加入供血者1%红细胞悬液50ul和受血者血浆25ul,次侧加入受血者1%红细胞悬液50ul和供血者血浆25ul(先加红细胞悬液后加血浆)。;4.将加样后的微住凝胶卡卡置于专用孵育器37℃孵育15分钟。
5.取出试剂卡,将孵育好的试剂卡置于专用离心机离心10分钟。
6.取出试剂卡,肉眼观察结果。;试验结果
1.阴性结果 若主侧和次侧管内红细胞均完全沉降与凝胶管底部,表明受血者与供血者血液相容,供血者血液可以输给受血者。
2.阳性结果 若主侧和次??管或单独一侧试管内红细胞凝集快位于凝胶表面或凝胶中,和(或)出现溶血,提示受血者与供血者血液不相容。;注意事项
1.凝胶介质交叉配血试验采用凝胶微柱技术,通过凝胶分子筛作用可以提高交叉配血试验的特异性和灵敏度。可同时检出IgG型和IgM型红细胞血型抗体,因此在临床输血检验中,可以不做盐水介质交叉配血试验。
;2.由于抗球蛋白试剂在装配试剂过程中已经加入到凝胶微柱内,进行离心时血清蛋白成分和红细胞因其各自的重力加速度不同而以不同的速度通过凝胶微柱,从而消除了血清中未结合的球蛋白与抗球蛋白试剂结合的可能性,因此使用凝胶微柱进行交叉配血试验时,红细胞可不洗涤;且对于阴性的交叉配血试验结果也不再需要加入IgG型血型抗体致敏的阳性对照细胞验证阴性结果的有效性。;3.试验结果易判定且可靠、直观
4.试验结果易于保存,也可以使用数码照相留取实验结果存档备用。
5.凝胶介质交叉配血试验的操作容易标准化,因此能减少不同人员在操作上的差异,保证试验的准确性;也可以使用全自动化仪器进行交叉配血试验。;6.不能使用溶血标本进行交叉配血试验。
7.凝胶卡使用前要仔细检查凝胶中有无气泡、凝胶表面液体是否干涸,凝胶卡外观正常时才能使用。;谢谢!;*
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