组织培养-胚胎培养.ppt

第六章 胚胎培养和离体授粉;雌蕊的主要部分是子房，子房的胚珠中产生胚囊，并在成熟胚囊中产生卵细胞，胚珠是子房中的重要结构。;胚发育和种子结构;一、胚培养;1.3 意义：;2、离体胚培养的发育途径; ;2.2 脱分化形成愈伤组织;2.3 胚“ 早熟萌发”;3、成熟胚的培养;4、原胚(幼胚)的培养;4.2 原胚培养的条件;4.2 原胚(幼胚)的培养的条件;4.2.5 有利幼胚培养的因素 胚乳看护培养，利于原胚的生长有明显的促进作用。 胚柄的存在对于幼胚的存活至关重要： 胚柄促进生长的活性，心形早期活性最高。而且保留胚柄减少对胚的直接损失。;二、胚乳培养;;2.2 胚乳培养的意义;2.3 胚乳培养的发展史 2.3.1 发展史 1933年，Lampe和Mills进行最初尝试。 1949年，LaRue报道玉米成熟胚乳长出愈伤。 其后，黑麦草，黄瓜，蓖麻相似的结果。 1973年，印度学者获得了三倍体胚乳再生植株。;2.3.2 由胚乳再生完整植株的物种 12科，20多种。 蔷薇科：苹果，梨，桃。 禾本科：大麦、玉米和水稻。 茄科：枸杞，马铃薯。;;3.1 胚乳愈伤组织的建立 绝大多数经历愈伤组织阶段（器官发生），极少数直接从胚乳直接分化器官(胚状体)。 3.2 胚乳发育时期 发育早期的胚乳，接种不方便，愈伤组织的诱导频率很低。 处于旺盛生长期的胚乳，离体条件下最易诱导产生愈伤组织。 接近成熟或完全成熟的胚乳，愈伤组织诱导频率很低。;3.3 培养基成份 WT、MS＋植物激素 3.3.1 生长素＋细胞分裂素合理搭配，效果更好 一般植物 均适宜 3.3.2 特殊种类激素 如: 大麦＋2,4-D 猕猴桃＋玉米素 3.3.3 无特别要求，任何一种生长素均可 如:枣;3.4 胚在胚乳培养中的作用 旺盛期的未成熟胚乳，在诱导培养基上无需原位胚的参与，就能形成愈伤组织。 完全成熟的胚乳，生理活动很弱，在诱导脱分化前，必须借助于原位胚的萌发，使其活化。 胚在萌发时产生某种物质“ 胚因子”。外源GA3能部分取代胚因子。;3.5 胚乳培养过程;4 胚乳再生植株的染色体倍性变异 很少三倍体(稳定型)，大多为二倍体，非整倍体(畸变型)。 WHY？ 畸变型胚乳类型：多倍性细胞嵌合体，核型胚乳 核型胚乳：被子植物中最普遍的胚乳发育形式。初生胚乳核第一次分裂和以后的多次分裂不伴随细胞壁的形成，胚乳核游离在胚囊中。 细胞型胚乳：从初生胚乳核分裂开始，产生细胞壁，形成胚乳细胞。;原因: 胚乳愈伤发生的部位：不同部位胚乳细胞染色体组成不同。 培养基中外源激素的种类和水平： 继代培养时间长短： ;三、胚珠和子房培养;2、外植体消毒和接种;思考题