microRNA芯片实验选择汇编.pdfVIP

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microRNA 芯片实验选择 microRNA (miRNA )作为 21 世纪生命科学研究最为重大的发现,已经在短时间内成为了世界 顶尖科学家研究的焦点, 并迅速取得了令人瞩目的进展, 短短几年关于 miRNA 的研究报道已近 2000 篇,并被《 Cell 》《 Nature 》等杂志大量收录。这些发现为我们勾勒了一个全新的、原本不为人知的 基因转录后调控系统,极大的扩展了人类对于基因调控方式的认识。 miRNA 通过 RNA 干扰这种独特 的方式影响着生命活动中的诸多方面,包括肿瘤的发生、发展、耐药;胚胎的分化、发育;细胞的凋 亡;细胞抗病毒感染等方面,以这些突破性进展为基础,而且 miRNA 也已经成为科学研究的重要工 具和多种疾病治疗的新手段。正是基于以上这些重大的意义,在 miRNA 参与的 RNAi 现象被发现仅 仅几年后,其发现者安德鲁费里和克拉格米洛便获得了 2006 诺贝尔生理学医学奖,这在科学界是十 分罕见的。 目前 miRNA 研究的领域包括:以发现新 miRNA 芯片技术首次被 Liu 等人报道用来检 miRNA 为目的的克隆鉴定工作; miRNA 生成、作 测 miRNA 在不同肿瘤细胞中的表达图谱 —— 245 用过程中的相关分子机制研究; 利用生物芯片平台 个哺乳动物的 miRNA 被检测,结果的重复性很好, 研究 miRNA 表达谱并以此为契机探索 miRNA 的 而且被 Northern 杂交、 RT-PCR 所证实。也有人 靶基因和功能( miRNA 参与肿瘤转移和耐药, 利用这种技术比较了哺乳动物中 B 细胞淋巴瘤和 miRNA 对病毒感染的影响)等。 正常细胞中 miRNA 的表达图谱,为 miRNA 在肿 瘤临床应用提出了新的思路;还有科学家通过 由于 miRNA 本身分子片段小, 种类多, 丰度 miRNA 芯片检测了小鼠脑发育中 138 个 miRNA 低,要总览 miRNAs 的全局表达和相互关系、 不同 基因的表达图谱。这些都说明了 miRNA 芯片技术 条件下表达差异、特别是与疾病的关系,以及 的巨大潜力。 miRNA 靶基因和功能研究等等,芯片技术无疑是 很好的选择。 这一技术的原理是收集待测样品中的 近期,在对 HIV 病毒研究方面,美国托马斯 miRNA ,与特定芯片上互补的探针杂交, 通常待测 杰弗逊大学的研究人员就利用 miRNA 芯片发现了 样品中的 miRNA 3 端会标记上荧光基团,杂交洗 细胞 mciroRNAs 抑制了休眠原代 CD4+T 细胞中 涤后可扫描荧光强度, 大量数据处理后便可筛选出 HIV-1 的产生,从而说明细胞中 miRNAs 对于 有显著表达差异的 miRNA 。由于芯片技术采用大 HIV-1 潜伏性至关重要, 也由此 miRNAs 方面的研 规模微阵列技术, 一张芯片上可以同时分析成百上 究被认为可能可以成为一种根除 HIV-1 的新方法, 千的探针, 大大提高了筛选的速度和通量, 因此是 这篇文章发表在《 Nature Medicine 》上。 miRNA 高通量研究的首选。 而且由于 miRNA

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