免疫学检测技术的基本原理.pptVIP

免疫学检测技术的基本原理 第一页，共33页 第一节 体外免疫反应的特点及影响因素※※ (一)抗原抗体反应的特点 高度特异性 特异性越强，亲和力也越高； 表面化学基团之间的可逆结合 抗原抗体结合除了空间结构互补外，主要以氢键、静电引力、范德华力和疏水键等非共价结合。不如共价键稳定，易受温度、酸碱度和离子强度的影响而解离，解离后抗原抗体仍具有原有特性； 适宜的抗原抗体浓度和比例 决定抗原抗体结合后能否出现肉眼可见的反应； 抗原抗体反应的2个阶段 第1阶段是抗原抗体特异性结合，可在数秒钟至几分钟内完成；第2阶段是小的抗原抗体复合物靠正负电荷吸引形成较大复合物，所需时间从数分钟至数日不等。 第二页，共33页 (二)抗原抗体反应的影响因素 电解质 抗原抗体等电点分别为pH3-5和pH5-6，在中性或弱碱性条件下表面带有较多负电荷，适当浓度的电解质会使它们失去一部分负电荷而相互结合； 温度 通常为37℃，适当提高反应温度可增加抗原与抗体分子的碰撞机会，但56℃以上可使抗原或抗体变性失活； 酸碱度 抗原抗体反应的最适pH值在6-8之间，pH值过高或过低均可直接影响抗原抗体的理化性质。当pH值接近等电点时，抗原抗体多带正负电荷相等，由于自身吸引而出现凝集，导致非特异性反应。 第三页，共33页 第二节 检测抗原和抗体的体外实验 第四页，共33页 Ab Ag 高亲