第七章农药及其代谢产物的测定分解PPT课件.ppt

第七章 农药及其代谢产物的测定;农药（pesticides）是指一大类主要用于防治农作物病虫害和杀灭林业、畜牧业、公共场所、建筑物和家庭虫害的化学物。;[ Introduction - Definition];分类（用途） ;;第一节 有机磷农药 第二节 有机氯农药 第三节 拟除虫菊酯类杀虫剂 第四节 杀虫脒;有机磷农药大多为磷酸酯类 (organophosphates)或硫代磷酸酯类 (thio-organophosphates)化合物包括磷酸酯类、硫代磷酸酯类、磷酰胺类、硫代磷酰胺类、焦磷酸酯类和硫代焦磷酸酯类等化合物。;商品化的有机磷农药有近百种，一半以上是有机磷农药与其他农药的混合制剂。 有机磷农药绝大部分为杀虫剂，少数为杀菌剂、除草剂等。;;一、理化特性;表7-1 常用有机磷农药的理化性质、毒性分类及ADI;class ;;二、代谢和生物监测指标;有机磷农药的氧化作用包括 脱硫作用、脱烷基作用、脱烷酰基作用、脱芳香基作用，硫酯基的氧化和单链氧化作用。氧化作用的后果往往使农药的毒性增强。 有机磷农药的水解作用常使农药的毒性降低。;在氧化、水解之后进一步在转移酶的作用下可以结合上羧酸、醇、酚、氨基，亚氨基等基团而排泄。 主要由尿、少量由粪便、呼出气排出。;有机磷农药的生化作用主要是 对胆碱酯酶的抑制。 中毒表现: 中枢及周围神经系统障碍。 ;体内有两类ChE 乙酰胆碱酯酶(AChE) 亦称真性ChE，具有水解Ach的特殊功能。主要分布于神经系统及红细胞表面(由神经细胞及幼稚红细胞合成)，对神经传导起作用的是真性ChE 丁酰胆碱酯酶(BuChE) 也称假性（拟）ChE，存在于血清、唾液腺及肝脏中(在肝脏中合成)，分解丁酰胆碱的作用较强，分解丙酰胆碱及乙酰胆碱的作用较弱 有机磷中毒时，两类ChE都可被抑制;（2）AChE有两个活性中心 阴离子部位和酶解部位 阴离子部位与Ach中带有正电荷的氮(N)结合 酶解部位与Ach中的乙酰基中的碳原子(C)结合，形成胆碱和乙酰化胆碱酯酶 乙酰化胆碱酯酶在乙酰水解酶的作用下水解，乙酰基形成乙酸，胆碱酯酶恢复原来状态;（3）有机磷对ChE的抑制作用;生物检测标志物;三、样品采集及保存;四、血液中有机磷农药的测定 ;气相色谱法;2.色谱条件 p115 ;3.样品处理和测定 用丙酮将100μg/ml的有机磷农药标准溶液配制成0.40、2.0、4.0μg/ml的标准溶液系列，进样2μl。以保留时间定性，峰高或峰面积定量，绘制标准曲线。 将酸处理过的血样从冷藏箱中取出，恢复至室温，取8.0ml（相当于2ml血样），置于10ml具塞刻度离心管中，加2ml环己烷振荡萃取，于2000r/min离心10min，收集上清液，将上清液通过已用环己烷处理过的PT-C18色谱预处理柱净化，再重复萃取、净化二次，收集净化液，在氮气流下挥发定容至0.10ml。取1～5μl进样。从标准曲线（色谱图）上查得农药种类和浓度。 ;注意事项; 固相微萃取关键在于选择石英纤维上的涂层（吸附剂），要使目标化合物能吸附在涂层上，而干扰化合物和溶剂不吸附，一般是：目标化合物是非极性时选择非极性涂层；目标化合物是极性时选择极性涂层。 采样方法是将固相微萃取针管（不锈钢套管）穿过样品瓶密封垫，插入样品瓶中。然后推出萃取头，将萃取头浸入样品（浸入方式）或置于样品上部空间（顶空方式），进行萃取。萃取时间大约2-30min，以达到目标化合物吸附平衡为准。最后缩回萃取头，将针管拔出。 ;五、全血胆碱酯酶活性的测定 ;当受一种以上有机磷农药影响、且又不明是何（几）种有机磷农药时，可考虑采用哪些测定方法？ ;;（一）三氯化铁分光光度法 ;;2.样品采集和处理 ;3.测定;4.注意事项 ;3．加碱性羟胺溶液和1+2盐酸时，必须严格控制振摇时间，使反应彻底，否则影响测定结果。 4．加三氯化铁溶液形成的棕色羟肟酸铁络合物易褪色，故必须在20min内比色完毕。 5．计算胆碱酯酶活性百分数，应以本地区正常人全血胆碱酯酶活性为基准。各地区测定正常值，例数不应少于30人。 ;（二）DTNB分光光度法;;2.样品采集和保存 ; 3.样品测定  4.注意事项 P117;第二节 有机氯农药;;绝大多数性质稳定，在正常环境条件下不易降解，易于在生物体内蓄积。 危害主要表现在中枢神经系统和对肝脏的作用。 我国从1983年起禁止生产有机氯农药，1985年起禁止使用。 ;一、理化性质;名称;二、代谢和生物监测指标;三、样品采集和保存;2.人乳 人乳采集时需脱离污染环境，在无污染条件下采集。采样时先用75%酒精消毒乳房皮肤，再用丙酮或正己烷擦拭，待干后才取样。用清