分子生物学常用技术.pptVIP

分子生物学考试 时间：2005.1.11(晚7:00-9:00) 地点 9教讲演厅 (150人) 9-2-1 (50人) 9-2-2 (50人) 9-3-1 (50人) 答疑：1.10 (9:00-11:30; 3:00-5:30) 地点：逸夫楼3楼生化实验室 第六十二页，共129页 三、探针(probe) 探针的概念 探针的类型 标记物的种类 标记方法 第六十三页，共129页 1. 探针的概念 特异结合和检测靶分子的活性物质 抗原－抗体 配体－受体 同源DNA/RNA 第六十四页，共129页 2. 探针的类型 基因组DNA探针 cDNA探针 RNA探针 寡核苷酸探针 蛋白质或多肽探针 第六十五页，共129页 3. 标记物的种类 放射性同位素(32P, 3H, 35S, 125I, 14C) 非放射性标记物 生物素 地高辛 荧光素 酶 第六十六页，共129页 4. 核酸探针的放射性标记方法 DNA缺口平移标记法 随机引物标记法 DNA的5’末端标记 第六十七页，共129页 缺口翻译 特点 均一标记 制备dsDNA探针 第六十八页，共129页 随机引物标记法(random priming) 随机引物 6nt 含有各种可能的排列顺序 特点 放射比活性缺口翻译 操作简便 DNA/cDNA 探针 第六十九