空气中细菌种类的测定.pdfVIP

如果对你有帮助，请下载使用！ 培养基的制备与空气中微生物的检测 一、实验目的与要求 1 、了解并掌握微生物所需的营养成分以及培养基的类型。 2 、学习并掌握牛肉膏蛋白胨培养基的配制原理， 配制方法以及熟悉实验步骤。 3 、掌握高压蒸汽灭菌器的原理以及了解其操作步骤。 4 、空气中微生物的检测。 二、实验原理 培养基是供微生物生长、 繁殖、代谢的混合养料。 由于微生物具有不同的营养类 型，对营养物质的要求也各不相同， 加之实验和研究的目的不同， 所以培养基的 种类很多， 使用的原料也各有差异， 但从营养角度分析， 培养基中一般含有微生 物所必需的碳源、氮源、无机盐、生长素以及水分等。另外，培养基还应具有适 宜的 pH 值、一定的缓冲能力、一定的氧化还原电位及合适的渗透压。 任何一 种培养基一经制成就应及时彻底灭菌， 以备纯培养用。 一般培养基的灭菌采用高 压蒸汽灭菌。 高压灭菌的原理是：在密闭的蒸锅内，其中的蒸汽不能外溢，压力不断上升， 使水的沸点不断提高，从而锅内温度也随之增加。在 0.1MPa 的压力下，锅内温 度达 121℃。在此蒸汽温度下， 可以彻底高效杀死各种细菌及其高度耐热的原理。 空气是人类赖以生存的必须环境， 也是微生物借以扩散的媒介。 空气中存在着细 菌、真菌、病毒、放线菌等多种微生物粒子，这些微生物粒子是空气污染物的重 要组成部分。 空气微生物主要来自于地面及实施、 人和动物的蹑手呼吸道、 皮肤 和毛发等， 它附着在空气气溶胶细小颗粒物表面， 可较长时间停留在空气中。 某 些微生物还可以随着空气中细小颗粒穿过人体肺癌存留在肺的深处， 给身体健康 带来严重危害， 也可以随着空气中细小颗粒物被输送到较远地区， 给人体带来许 多传染性的疾病和上呼吸道疾病。 因此，空气微生物含量多少可以反映所在区域 的空气质量， 是空气环境污染的一个重要参数评价空气的清洁程度， 需要测定空 气中的微生物数量和空气污染微生物。 三、实验内容 1 、牛肉膏蛋白胨培养基的制备。 2 、高压灭菌。 3 、空气中微生物的检测。 四、实验步骤 1 、查配方 牛肉膏蛋白胨培养基的配方：牛肉膏 1g ；蛋白胨 2g ；NaCl 1g ；琼脂粉 4g ； 蒸馏水 200mL；pH 7.0 — 7.2 。 2 、称量 3 、配制 先将牛肉膏、蛋白胨溶入烧杯中搅拌至完全溶解，再加入其他成分一次溶解， 倒入 500mL的锥形瓶中，加水至 200mL，加入琼脂粉，拿报纸封口。 4 、高压灭菌 5 、分装，凝固 6 、暴露取样：在指定的地点：一楼、三楼、五楼、七楼各放 2 皿，将平板皿 盖打开，在空气中暴露 10min，时间一到，立即合上皿盖。 7 、培养观察： 把培养皿置于生化培养箱培养， 于 48h 后记录所生长的菌落数。 1 如果对你有帮助，请下载使用！ 8 、计算 1 平方米空气中的微生物的数目。 奥梅染斯基曾建议：如面积为 100 ㎝ 2 的平板培养基，暴露在空气中 10 分 钟，置于 37℃培养 24 小时后所生长的菌落数，相当于