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第四章 酶工程与食品产业;1.酶由生物体产生
2.酶与生命活动密切相关
3.酶主要是蛋白质;1.酶由生物体产生1;1.酶由生物体产生2;2.酶与生命活动密切相关;3.酶主要是蛋白质;酶的催化特性;1、与一般催化剂的共性;(一)高度的催化效率
(二)高度的特异性
(三)可调节性
;酶活性部位和必需基团;酶的活性中心;结合基团:与底物结合的必需基团
催化基团:直接参与催化反应的必需基团;第一节 酶工程概述;?酶工程与发酵工程、基因工程、细胞工程的关系 ;二、酶工程的内容 ;(二)生物酶???程 ;当前酶工程的主要任务是:
?研制分解纤维素和木质素的酶、使低分子有机物聚合的酶、检测用酶、能分解有毒物质的酶及废物综合利用酶。?
利用基因工程技术开发新酶品种和提高酶产量。?
固定化酶和细胞、固定化多酶体系及辅因子再生体系,特定生物反应的研究和应用。?
用微生物和动植物组织研究生物传感器。
非水系统的反应技术,酶分子的修饰与改造以及酶型高效催化剂的人工合成研究。 ;第二节 食品酶的生产与分离纯化 ;(一)对酶生产菌的要求 ;例如:纤维素酶是一种复合酶,包括
葡萄糖内切酶(EG) :作用于纤维素分子内部的非结晶区,随机水解β-1,4糖苷键,产生小分子纤维素.
葡萄糖外切酶(纤维二糖水解酶,CBH):作用于纤维素分子末端,水解β-1,4糖苷键,每次切下一个纤维二糖分子.
β-葡萄糖苷酶(BG):水解纤维二糖和小分子纤维素,生产葡萄糖.;生产纤维素酶的主要菌种有:
细菌:纤维素酶产量低,为胞内酶或吸附在细胞壁上,提取纯化困难。研究较多的为纤维素黏菌属、生孢纤维素黏菌属、纤维粘杆菌属。
霉菌:目前生产纤维素酶的微生物大多为霉菌。研究较多的为木霉属、曲霉属、根霉属、漆斑霉属,纤维素酶产量高。;纤维素酶在食品工业中的应用;果蔬生产
种子蛋白利用:用于大豆脱皮
速溶茶的生产
可发酵糖的生产
琼脂生产
酱油酿造
酒精酿造
;淀粉酶
是水解淀粉的酶类,包括α-淀粉酶、β-淀粉酶、葡萄糖淀粉酶、异淀粉酶;β-淀粉酶:从淀粉分子的非还原端水解α-1,4糖苷键,依次切下一个麦芽糖.不能水解α-1,6糖苷键水解产物糊精和麦芽糖.
生产菌种:主要为芽孢杆菌、假单孢菌、放线菌等。;淀粉酶在食品工业上的应用
果葡糖浆的生产
是一种果糖和葡萄糖为主要成分的混合糖浆。
生产工艺:
淀粉 α-淀粉酶 液化型淀粉 葡萄糖淀粉酶 糖化 葡萄糖异构酶 混合糖浆;超高麦芽糖浆的生产
工艺流程:
淀粉 α-淀粉酶 液化型淀粉 β-淀粉酶和异淀粉酶 糖化 脱色 超高麦芽糖浆;(二)?发酵方法与发酵条件??
用于酶生产的发酵方法有:
1、固体发酵法??
即以麸皮、米糠等为基本原料,加无机盐和适量水分(通常50%左右)进行的一种微生物培养法。
用青霉、曲霉生产果胶酶;用木霉生产纤维素酶
2、液体发酵法??
利用合成的液体培养基在发酵罐内进行搅拌通气培养,目前主要的方式。;(1)间歇发酵法:
特点:先在适于菌体生长条件下培养,然后再转入产酶条件下进行发酵。产酶量高,同时营养物质与诱导物浪费少。
(2)连续发酵法:
特点:先将菌体培养至某一生长期如对数期,然后一面连续加入新鲜培养液,另外又不断地以相同速度放出培养产物,二者的速度还应和生长速度一致,使菌体生长处于恒态条件,同时还可能打破酶合成的反馈阻遏,使产酶率提高。 ;发酵条件既要有利菌体生长繁殖,又不影响酶的形成。
影响发酵的条件:
首先,培养基组成,
其次,通风量、培养温度等因素;(三)?提高酶产量的方法 ;1、通过条件控制提高酶产量
(1)添加诱导物?:?这种方法只适应于诱导酶的合成。其关键在于选择适宜的诱导物及其浓度。
诱导物:
一是酶的作用底物,但有些底物并不一定是诱导物;
二是一些难以代谢的底物类似物。
三是诱导物的前体物质。
此外,对于参加分解代谢的胞外酶,它们的产物也往往行诱导作用,如纤维二糖诱导纤维素酶。
;(2)降低阻遏物浓度:??
对于受分解代谢产物阻遏的酶,常采用直接限制碳源或相应的生长因子供应。
对于合成代谢的酶解决尾产物阻遏的方法
在培养基中添加尾产物类似物或尾产物形成的抑制剂
采用营养缺陷型菌株,限制其必须生长因子的供应;2、通过基因突变提高酶产量????
根据酶合成的调节机构,要使酶产量因基因突变而提高,有两种可能:
一是使诱导型变成组成型:即获得的突变株在没有诱导物存在的条件下酶产量达诱导的水平;
二是使阻遏型变为去阻遏型:即获得的突变株在引起阻遏的条件下,酶产量达到无阻遏的水平。 ;3、其他提高酶产量的方法
?(1)添加表面活性剂:??
人们发现许多表面活性剂能提高酶的产量,特别有利于霉菌胞外酶的生产,而且它们对菌和酶没有专一性,通常用的是非离子型表面
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