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甲醛吸入对小鼠免疫系统毒性作用 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 2 文1：甲醛吸入对小鼠免疫系统毒性作用 2 1 材料与方法 2 11 主要试剂 2 12　仪器及设备 3 13 实验方法 3 14 免疫指标测定 3 15 统计分析 4 2 结果 4 23 脾淋巴细胞功能转化实验 5 24 迟发型超敏反应测定 5 25 抗体生成细胞测定 5 26 巨噬细胞吞噬功能测定 5 3 讨论 6 文2：探讨甲醛对小鼠肝脏组织及细胞的毒性作用 6 1、 材料与方法 7 1． 1 实验材料 7 1． 1． 1 实验动物 7 1． 1． 2 主要试剂 7 1． 1． 3 实验仪器 7 1． 2 实验方法 8 1． 2． 1 实验分组 8 1． 2． 2 试验方法 8 1． 2． 3 行为观察 8 1． 2． 4 肝组织的形态及病理学观察 8 (1) 肝组织形态的肉眼观察 8 1． 3 统计分析 9 2、 结果 9 2． 1 小鼠行为及体重变化 9 2． 2 肝组织的形态及病理学观察 9 2． 2． 1 肉眼观察 9 2． 2． 2 光镜观察 9 3、 讨论 10 3． 1 小鼠行为变化 10 3． 2 肝组织的形态及病理学观察 10 参考文摘引言： 11 原创性声明（模板） 13 文章致谢（模板） 13 正文 甲醛吸入对小鼠免疫系统毒性作用 文1：甲醛吸入对小鼠免疫系统毒性作用 近年来，随着社会 发展 和人民生活水平的不断提高，室内空气污染已成为一个公众所关注、迫切需要解决的卫生问题〔1〕。甲醛(Formaldehyde,FA)是造成室内空气污染的主要物质〔2〕，其对人体的健康危害不容忽视。目前，对甲醛造成的免疫损伤国内外研究较少。因此，本文从免疫病理、细胞免疫、体液免疫及非特异性免疫等4个方面对甲醛的免疫毒性作用进行了研究，为建立甲醛免疫毒性的卫生标准提供理论依据。 1 材料与方法 11 主要试剂 甲醛，分析纯(上海溶剂厂)；注射用环磷酰胺(CP)(上海华联制药有限公司)；淋巴细胞分离液，Q/GHSB 85-2001(上海恒信化学试剂有限公司)；3-氨丙基三乙氧硅烷(APES)，32K1265(武汉博士德生物工程有限公司);兔抗鼠CD3、CD4、CD8单克隆抗体，即用型C7219K(天津灏洋生物工程有限责任公司);浓缩型二氨基联苯胺显色(DAB)试剂盒(天津灏洋生物工程有限责任公司);刀豆蛋白A(ConA)、四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)试剂盒(北京夏斯生物技术有限公司) 12　仪器及设备 50?L静式染毒柜；GS-3交直流两用大气采样仪；VIS-7220分光光度计：PRECISA 300MC 电子 天平；SHZ-22水浴恒温振荡器；光学显微镜，BH-2(日本OLYMPUS公司)；QL-901旋涡混合器等。 13 实验方法 采用健康昆明种纯系小鼠30只，鼠龄7周，体重18～22?g(山西医科大学动物中心)。将动物随机分为5组(即阴性对照组，1，3，5?mg/m3染毒组和阳性对照组)，每组6只，雌雄各半。采用甲醛静式吸入染毒，每天染毒2?h，连续染毒14?d。阴性对照组吸入过滤的新鲜空气，处理时间与染毒组相同。阳性对照组从第8?d开始，每日按40?mg/(kg·bw)(用生理盐水配制)腹腔注射环磷酰胺(CP)，连续7?d。染毒结束次日称重小鼠后，颈椎脱臼处死，无菌取脾脏、胸腺，除去血液，滤纸吸干，称重。 14 免疫指标测定 (1)计算脾脏(胸腺)系数：脾脏(胸腺)系数=器官重量(mg)/体重(g)；(2)脾脏和胸腺CD3含量、CD4含量、CD8含量测定：将取出的小鼠脾脏、胸腺按 文献 〔3〕方法制备成浓度为1×106的细胞悬液，再取其50?μl滴于经APES处理过的载玻片上，制成淋巴细胞涂片，之后分别按试剂盒说明书对脾脏、胸腺CD3、CD4、CD8含量进行测定，计算阳性细胞率；(3)脾脏淋巴细胞功能转化测定：采用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法〔4〕； (4)迟发型超敏反应测定：采用足垫增厚法〔5〕；(5)抗体生成细胞数测定：采用溶血空斑试验(PFC试验)〔6〕；(6)巨噬细胞吞噬功功能测定：采用鸡红细胞吞噬实验〔7〕 15 统计分析 采用SPSS?100统计软件进行方差齐性检验、方差分析、相关分析。 2 结果 21 小鼠脾脏、胸腺系数测定(表1) 表1 甲醛对小鼠脾脏、胸腺系数的影响(略)注：与阴性对照组比较，* P005，** P001 从表1可知，各甲醛