肝外胆管癌中p73蛋白的表达及与p53蛋白的相关性.doc

肝外胆管癌中p73蛋白的表达及与p53蛋白的相关性 作者：张智勇，窦科峰，刘正才 【关键词】 免疫组织化学, 关键词: 蛋白质p73，蛋白质p53;胆管癌;免疫组织化学 摘 要:目的 探讨基因p73和p53在肝外胆管癌（ECHC）中的表达情况、相互关系及其临床病理意义. 方法 采用免疫组织化学（SABC法）对41例肝外胆管癌及10例胆总管囊肿病例p73和p53表达进行研究. 结果 p73基因阳性表达率为41%（17/41），p53基因阳性表达率为34%（14/41），14例中10例p73表达亦为阳性，其余27例中未发现p53基因突变，但其中7例表达p73.胆总管囊肿均为阴性.经统计学分析p73的表达与ECHC的临床病理分级、分期无关（Pgt;0.05）;而p73和p53表达显著相关（r=0.52，Plt;0.05）. 结论 p73，p53基因在肝外胆管癌的发生发展过程中起重要作用，二者的表达有一定的相关性. 　　Keywords:protein p73;protein p53;cholangiocarcinoma;immunohistochemistry 　　Abstract:AIM To study p73and p53gene expressions in extrahepatic cholangiocarcinoma（ECHC）and their clinico-pathological significance.METHODS Immunohistochemical method（SABC）was used to detect the p73and p53gene ex-pressions in41cases of ECHC and10cases of choledo┐chocyst.RESULTS Positive rates of p73and p53gene were41%（17/41），34%（14/41）resepectively.10of the14cases　were also stained positive for p73.In contrast，in the rest of the patients（27）without any detectable p53mutation，7ex-hibited p73immunostaining.Neither p73nor p53was detect-ed in choledochocyst.There was no significant difference in expression of p73between tumor grade and heson stage.But expression of p73was significantly correlated to that of p53（r=0.52，Plt;0.05）.CONCLUSION Both p73and p53genes play an important role in the development of ECHC.The expressions of p73and p53in ECHC are significantly correlated. 　　0 引言 　　肝外胆管癌（extrahepatic cholangiocarcinoma，ECHC）不很常见，恶性度很高，疗效很差.p73基因是近年发现的p53家族的新成员，我们检测了ECHC中p73和p53基因的表达，探讨ECHC中二者间的关系及其临床病理意义. 　　1 材料和方法 　　1.1 材料 ECHC41例和胆总管囊肿标本10例均取自西京医院病理科手术标本.HE染色复查诊断并按WHO病理学分级标准和Heson分期标准:高分化癌20例，中分化癌14例，低分化癌7例.其中Ⅰ期18例，Ⅱ期13例，Ⅲ期8例，Ⅳ期2例.羊抗人p73多克隆抗体，Santa Cruz公司出品.鼠抗人p53mAb，Sigma公司产品.SABC免疫组化试剂盒为武汉博士德公司产品.DAB为Sigma公司产品. 　　1.2 方法 标本经40g#12539;L-1 甲醛固定，常规石蜡包埋，均作4μm连续切片.按SABC免疫组化染色步骤进行，其间行3mol#12539;L-1 尿素溶液消化30min，0.01moL#12539;L-1 枸橼酸钠缓冲液（pH6.0）中微波修复抗原15min，一抗1∶50稀释，4℃过夜.显色后苏木精衬染，设空白对照，PBS代替一抗的阴性对照，及已知的阳性对照.结果判断:细胞核呈现清晰的棕黄色颗粒为阳性.按阳性细胞所占的比例及显色深度分为:阳性细胞gt;50%，显色深，颗粒粗;:阳性