花边莲提取液对人肺癌SPC.docVIP

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花边莲提取液对人肺癌SPC 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1:花边莲提取液对人肺癌SPC 1 1 材料与方法 2 2 结果 5 3 讨论 6 文2:土鳖虫提取液对人胃低分化腺癌细胞BGC 7 1 材料与方法 8 2 结果 10 3 讨论 11 参考文摘引言: 12 原创性声明(模板) 13 文章致谢(模板) 13 正文 花边莲提取液对人肺癌SPC 文1:花边莲提取液对人肺癌SPC Influence of HuaBianLian Extract on Expression of Apoptosis Associated Genes Survivin and Caspase3 in Human Lung Cancer SPCA1 Cells Abstract:ObjectiveTo investigate the influence of HuaBianLian(HBL) extract on expression of apoptosis associated genes survivin and caspase3 in human lung cancer SPCA1 human lung cancer SPCA1 cells were randomly divided into the control group (the negative control group),HBL-treated groups(,,50 ml/L) and DDP(25 mg/L) group (the positive control group).The expression of survivin and caspase3 mRNA was detected by semiquantitive RTPCR .The expression of survivin and caspase-3 protei were detected by twostep immunhistochemical with control group ,the expression of caspase 3 mRNA and protein increased significanty (P<),while survivin mRNA and protein decreased markedly in HBL groups (P<).ConclusionThe molecular mechanism of HBL apoptosis inducing of SPCA1 cells may be associated with the upregulating expression of caspase-3 gene and downregulating expression of survivin gene. Key words:HuaBianLian; SPCA1 cells; Apoptosis; Survivin gene; Caspase3 gene 前期研究表明,中药复方花边莲HuaBianLian, HBL提取液对人肺癌SPCA1细胞具有较强的增殖抑制和诱导细胞凋亡作用[1],但其作用机理尚不明确。大量研究证据表明,细胞凋亡调节机理是多种基因互相作用、综合调节的结果。生存素(Survivin)是最近发现的凋亡抑制蛋白(inhibito of apoptosis protein,IAP),它通过直接作用于细胞凋亡途径中的终末效应酶半胱氨酸蛋白酶Caspase3和Caspase7阻断细胞凋亡途径[2]。Caspase3与凋亡关系最为密切,参与多种因素诱导的细胞凋亡。本实验观察HBL提取液对人肺癌SPCA1细胞凋亡相关基因survivin和caspase3表达变化的影响,探讨该药方抗肿瘤作用的可能分子机理。 1 材料与方法 材料 细胞人肺癌SPCA1细胞株由中科院上海细胞生物研究所细胞库提供。 试剂与仪器胎牛血清(FBS)、RPMI 1640培养基为GIBCO公司产品,顺铂(DDP)为锦州九泰药业有限责任公司产品,RNA提取试剂盒为BIODEVTECH公司产品,Access RTPCR system为Promega公司产品,PCR引物为上海生工生物工程公司合成,鼠抗survivin(D8):sc 17779和caspase3(E8):sc7272单克隆抗体为Santa cruz公司产品,PowerVisionTM免疫组化检测试剂(PV6001/6002)为北京中杉金桥生物技术公司产品。倒置显微镜(Cioc),BX51型显微镜(OLYMPUS)

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