糖皮质激素瘤内注射治疗婴幼儿血管瘤机理的研究.docVIP

糖皮质激素瘤内注射治疗婴幼儿血管瘤机理的研究 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：糖皮质激素瘤内注射治疗婴幼儿血管瘤机理的研究 1 1材料和方法 2 文2：糖皮质激素在治疗中的机理与应用进展综述 6 一、糖皮质激素的合成及代谢 6 二、糖皮质激素水平变化 6 三、糖皮质激素治疗重症肺炎机制 7 参考文摘引言： 8 原创性声明（模板） 9 文章致谢（模板） 10 正文 糖皮质激素瘤内注射治疗婴幼儿血管瘤机理的研究 文1：糖皮质激素瘤内注射治疗婴幼儿血管瘤机理的研究 0引言 血管瘤（不包括血管畸形）是小儿最常见的肿瘤，绝大多数为良性［1］. 糖皮质激素治疗是目前公认的首选方法［2-3］. 但其治疗机理目前并不十分清楚，且在临床上，仍有部分血管瘤疗效不明显. 本文通过检测血管瘤血管内皮细胞（vascular endothelia cell，VEC）的增殖、凋亡以及凋亡调控指标，结合光镜及电镜下组织形态学变化，初步探讨激素治疗血管瘤的机理，为提高临床疗效提供思路. 1材料和方法 材料 199906/200405手术切除的草莓状血管瘤标本50例及正常皮肤标本16例，血管瘤标本取自4月到2岁患者，其中未治疗组15例，治疗显效组18例，无效组17例，男女比例为1∶2. 原位细胞凋亡检测试剂盒（宝灵曼公司）；鼠抗人PCNA单克隆抗体（福州迈新生物技术开发公司）；cmyc及bcl2试剂盒（福州迈新公司）；SP试剂盒（北京中山生物技术有限公司） 方法 免疫组化染色用过氧化物酶抗过氧化物酶法检测 VEC的增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen，PCNA）水平及cmyc和bcl2的表达水平. PCNA，cmyc以胞核染色棕色者为阳性，而bcl2以胞浆中见棕色颗粒者为阳性. 光镜400倍下不同视野随机观察300个VEC，计阳性细胞数，然后 计算 每100个细胞中阳性细胞数，记为阳性表达率(positive rate) 凋亡细胞的原位检测 采用末端脱氧核糖核苷酸转移酶介导的带荧光的dUTP缺口末端标记法（TdTmediated dUTP nick end labeling, TUENL），原位标记凋亡细胞核中的DNA片段3′OH末端，显示未治疗组、治疗显效组和治疗无效组及正常对照组VEC的凋亡. 检测方法按宝灵曼公司试剂盒说明书进行，以PBS代替生物素化的dUTP作为阴性对照. 光镜400倍下不同视野随机观察300个VEC，均以胞核染色棕色者为阳性，计阳性细胞数，然后计算每100个细胞中阳性细胞数，即凋亡指数. 光镜下组织形态学标本进行常规染色后，光学显微镜下观察其组织学特点、VEC增殖情况及血管壁结构完整性. 透射电镜观察显效组1例(6 mo，女)细胞超微结构变化常规无菌术切除血管瘤瘤体，修去脂肪组织后切成小块，用 g/L戊二醛固定，按常规方法制备半薄切片、超薄切片，H600型透射 电子 显微镜观察、摄片. 取同龄小儿择期手术中所弃正常皮肤作为对照. 统计学处理：计量资料用x±s表示，组间均数比较经SAS统计软件进行方差分析和q检验，P为有统计学意义. 2结果 光镜下组织形态学与正常皮肤组相比，显效组18例血管瘤在镜下以脂肪组织及少量纤维组织为主，VEC无明显增殖现象，未见明显淋巴细胞浸润、血管壁塌陷、管腔堵塞及VEC脱落等组织结构破坏征象；未治疗组15例以及无效组17例在镜下以大量增生的血管为主，VEC增殖活跃,未见前述组织结构破坏征象（图1A~D） 透射电子显微镜观察与正常皮肤组织相比，显效组血管瘤组织中许多VEC呈典型的凋亡形态变化，染色质固缩聚于核膜下，境界分明，有完整的核膜包绕，细胞浆浓缩，可见线粒体轻度肿胀等而基本未见到明显的VEC坏死征象（图2A~D） A: 正常皮肤; B: 显效组血管瘤中凋亡的血管内皮细胞. 增殖及凋亡情况于光学显微镜下按上述标准计数，结果显示显效组VEC的凋亡水平高于无效组、未治疗组及正常皮肤组（P），而增殖水平低于上述三组（P）. bcl2：无效组和未治疗组间无统计学差异, 其余各组间均有统计学差异. cmyc：无效组和未治疗组，显效组和正常皮肤组间无统计学差异，余各组间有统计学差异（表1）.表1VEC凋亡指数及各指标阳性表达指数(略) 3讨论 血管瘤是小儿最常见的肿瘤，多数能 自然 、缓慢地消退. 但某些生长在颜面、颈部等特殊部位或增长特别迅速者可影响正常器官功能或引起溃疡、出血和疼痛等并发症，需积极 治疗 . 临床上使用糖皮质激素治疗血管瘤已有多年，主要有强的松口服或缩丙酮确炎舒松及倍他米松［2］瘤体内注射等途径. 和激光、冷冻、同位素敷帖及硬