实验7脂质的提取和薄层层析.docVIP

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  • 2021-11-29 发布于山东
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实验7 脂质的提取和薄层层析 一、原理 生物组织中含有多种脂类物质,包括三酰甘油、胆固醇、脑磷脂、卵磷脂和游离脂肪 酸等,它们都能溶于有机溶剂,故能用有机溶剂抽提。为了把脂类完全提取,本实验借助 于索氏(Soxhlet)抽提器进行循环抽提。 所提取的脂类可在铺有吸附剂硅胶G的玻璃板上进行吸附薄层层析,由于吸附剂对样品中各成分的吸附力不同,当展层溶剂(流动相)通过时,吸附力小的成分移动得快,吸附力大的成分移动得慢,因此各组分就被一一分开。这是一种微量、快速,分辨率很高的方法,可用于混合物的分离、提纯和含量测定。 二、 试剂及器材 (1) 乙醚。 (2) 氯仿。 (3) 硅胶G (200目)。 (4) 碘。 (5) 0.3%(W/V) 羧甲基纤维素钠。 (6) 展层溶剂:己烷:乙醚:乙酸:甲醇=90:20:2:3(V/V)。 (7) 胆固醇标准液(1mg/m1)。 (8) 玻璃板15cm×3cm。 (9) 层折缸。 三、 操作 1.脂质的提取 如图7—1所示,将仪器装好,样品(煮熟的蛋黄等)必须干燥、研碎,用滤纸包扎好,放在提取管中,接通冷凝管冷水入口,将提取瓶固定于水浴锅中。提取瓶中注入有机溶剂(本实验用乙醚)(1)至半满,在恒温水浴锅上加热。溶剂蒸汽自连接管上升,在冷凝管

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