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细胞培养复习题 (含答案 ) 1、体外培养的细胞按生长方式可分为哪二种 ? 按细胞在体外生长的形态特征 , 可分为 哪几种常见类型 ? ⑴按生长方式分为二型 : 粘附型细胞 : 附着在某一固相支持物表面才能生长的细胞。 悬浮型细胞 : 不必附着于固相支持物表面 , 而在悬浮状态下即可生长的细胞。 ( 绝大多 数有机体细胞属粘附型细胞。 ) ⑵可分四型 :(1) 上皮型细胞 (2) 成纤维型细胞 (3) 游走型细胞 (4) 多形型细胞 2、简述体外培养细胞的整个生命活动过程的分期及每代贴附生长细胞的生长过程 ⑴通常 ,体外培养细胞的全部生命期大致可被分为以下三个阶段 : ①原代培养期 :也称初代培养 ,就是指从机体中取出细胞接种培养到第一次传代之前的 这一阶段。此期的细胞呈现出活跃移动的特点 ,可见细胞分裂 ,但不旺盛。处于原代培养 阶段的细胞与体内原组织在形态结构与功能活动上有很大的相似性。细胞群具有明显 的异质性 ,细胞间的相互依存性强 ,在软琼脂培养基培养时细胞集落形成率很低。 ② .传代期 :通常就是培养细胞全生命期中持续时间最长的时期 ,原代培养的细胞经传代 后常被称做细胞系。一般情况下 ,正常体细胞在传代 10-50 次左右后 ,细胞分裂的能力就 会逐渐减弱 ,甚至完全丧失 ,细胞便进入衰退期。 ③衰退期 :处于衰退期的培养细胞 ,增殖速率已经变得很慢或不再增殖 ,直至最后衰退死 亡。 以上特点 ,主要就是针对体外培养的机体正常细胞 ,对于体外发生转化的细胞与肿瘤细 胞而言 ,永生性或恶型性的获得使得这类细胞获得持久性的增殖能力 ,这样的细胞群体 常被称为无限细胞系或连续细胞系。 ⑵每代贴附生长细胞的生长过程 : ①游离期 :细胞接种后在培养液中呈悬浮状态 ,也称悬 浮期。此时细胞质回缩 ,胞体呈圆球形。时间 :10 分钟一 4 小时②贴壁期 :细胞附着于底 物上 ,游离期结束。 底物 :玻璃、塑料、胶原、其它细胞等③潜伏期 :此时细胞有生长活动 , 而无细胞分裂。细胞株潜伏期一般为 6～24 小时。④对数生长期 :细胞数随时间变化成 倍增长 ,活力最佳 ,最适合进行实验研究。 ⑤停止期 (平台期 ):细胞长满瓶壁后 ,细胞虽有活 力但不再分裂 机制 :接触抑制、密度限制 3、简述体外培养细胞对生存环境的基本要求、 1 细胞培养复习题 (含答案 ) ⑴细胞的营养需要 :①基本营养物质 : 氨基酸 ( １２种＋谷氨酰胺 ) 、维生素、葡萄糖、 核糖、脱氧核糖等无机离子。 ②促细胞生长因子 :多由血清提供 ⑵细胞的生存环境 :①温度条件对细胞生长的影响 :不同生物来源的组织细胞培养温度 不同 ;体外培养动物细胞最常用的温度就是 37℃,耐低温不耐高温。在生理温度范围内 , 温度与细胞生长率之间存在正相关关系。 ②气相环境对细胞生长的影响 :动物细胞培养 的气相环境都就是采用 5%CO2 与 95%空气 (提供氧 ) 的混合气体。Ｏ 2 参与细胞的能量 代谢过程 , ＣＯ2 用于维持培养液的酸碱度 ,一般多为开放式培养 ③培养液的酸碱度对