实验2 琥珀酸脱氢酶的作用久其充争性抑制的观察.docVIP

PAGE PAGE 1 实验2 琥珀酸脱氢酶的作用及其竟争性抑制的观察 一、原理 脱氢酶的作用在于激活并脱下底物上的氢，使之通过一系列传递体最后传给氧而生成水。在缺氧的条件下，适当的受氢体也可接受脱氢酶从底物上脱下的氢。因此，选用适当的受氢体便可以观察到脱氢酶的作用。 琥珀酸脱氢酶能使琥珀酸脱氢生成延胡索酸，：并将脱下的氢交给受氢体。当在缺氧的条件下可用甲烯蓝(美蓝，蓝色物质)作为受氢体时，甲烯蓝被氢还原生成甲烯白(美白，无色物质)，其反应如下： CH2—COOH 琥珀酸脱氢酶 HC—COOH +MB +MB·2H CH2—COOH 无氧条件 HOOC—CH 琥珀酸、 甲烯蓝 延胡索酸 甲烯白 根据这种蓝色转变为无色的变化过程，就可以判断出琥珀酸脱氢酶起了催化作用。 丙二酸的结构与琥珀酸相似，可与琥珀酸竞相结合琥珀酸脱氢酶的活性中心，从而抑制该酶的活性，是琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制剂。这却抑制作用即属酶的竞争性抑制作用。 由于甲烯白容易被空气中氧所氧化，所以实验需在无氧条件下进行。例如，用