仪器分析教学讲义荧光光度法讲义.pptVIP

本次课内容 影响荧光强度的因素及溶液荧光的猝灭（P93~95） 荧光强度与溶液浓度的关系(P93) 荧光分光光度计(P95) 分子荧光分析法的应用(P97) 1. 影响荧光强度的因素（P93） (1) 溶剂 一般溶剂效应 特殊溶剂效应 溶剂极性的影响 n л* л л* 1. 影响荧光强度的因素 (2) 温度——低温下测定，提高灵敏度 温度升高 分子间碰撞增加 分子内能转化加速 荧光强度降低 温度下降 介质粘度增大 分子间碰撞减 少 荧光强度增强 1. 影响荧光强度的因素 (3) pH值的影响 当荧光物质本身是弱酸或弱碱时，溶液pH值对该物质荧光强度有较大影响。 pH≈1有荧光 pH≈13无荧光 例：苯酚 离子化后，荧光消失 1. 影响荧光强度的因素 (4) 内滤光作用和自吸收现象 内滤光作用：溶液中若存在能吸收激发光或荧光体所发射荧光的物质，会使荧光减弱的现象。 自吸收现象：荧光物质的荧光发射光谱短波长一端与该物质的吸收光谱的长波长一端有重叠，在溶液浓度较大时，一部分荧光被自身吸收。 1. 影响荧光强度的因素 散射光：当一束平行光投射在液体样品上，大 部分光线透过溶液，小部分由于光子和物质分子碰撞，使光子运动方向发生改变而向不同角度散射，这种光称散射光( scatterin