基因操作豪原理04.pptVIP

;;2. 聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE） 优点: 分离率高 1 bp, 点样量高 10?g 回收的DNA纯度高 非变性: 迁移率与序列和组成有关 变性(尿素/甲醛): 无关，分离探针，S1酸产物分析，DNA测序;三、DNA片段的纯化（从agarose） 1.低熔点agarose电泳 gel + 5vol tris 65℃ 5min phenol extract ethanol 2.透析袋，电洗脱法 可用于?5kb 3.Glass Milk (bead) 3M NaI 溶液，bead吸附 洗涤 elute 4.Kit Qiagen 公司;一个典型哺乳动物细胞约含 10-5?g RNA，其中80-85%为rRNA(28S,18S和5S/23S,16S,5S)三种类型)，其余15～20%主要由各种类型的低分子量RNA组成（如tRNA，核内小分子RNA等）。 mRNA为总RNA的1～5%，3‘端有一个poly(A)尾，可与oligo(dT)-纤维素，吸附，亲和层析分离寡脱氧胸苷酸。;一、注意事项控制RNA酶的活性 (一) 实验用具和溶液的去RNA酶处理 1. 玻璃制品、塑料制品、电泳槽 一次性使用用品/第一次使用的用具，可稍作处理 器皿：180℃ 8hr or longer， 氯仿冲洗/NaOH