分子生物学实验讲义整理.pdfVIP

实 验 讲 义 课程名称： 分子生物学实验 课程性质： 专业课 课程类型： 必修课 专 业： 生物工程、生物技术、生物科学 学 时： 80 、32 生物科学与工程学院分子生物学实验室 目 录 一、课程说明 二、实验要求 二、实验内容 实验一 实验室主要规定和分子生物学实验常用仪器使用 实验二 碱裂解法小量提取质粒 DNA 实验三 感受态细胞的制备及转化 实验四 基因组 DNA的提取 实验五 特异性片段 PCR的扩增 实验六 外源基因在大肠杆菌中的诱导表达 实验七 利用 ITS 序列鉴定真菌 实验八 外源基因在大肠杆菌中诱导表达的条件优化 一、课程说明 分子生物学实验课程是一门年轻的课程。 90 年代初期，随着分子生物学日新月异的 发展，分子生物学实验技术已成为生命科学各学科重要的研究工具。由于需要较高的经费 投入，师资不足等原因，国内高校中还没有分子生物学实验课程。高等学校生命科学各专 业的学生要适应时代的发展，除了需要学习分子生物学理论和分子生物学技术的基本知识 以外，还必须系统地培养学生在分子生物学方面的技术素养与动手能力，我们在 2008 年 修订本科培养方案时将分子生物学实验作为一门独立的课程，并作为生命科学各专业学生 的专业必修课。 单独开设分子生物学实验这门课后，在原有的基础上又增加了新的分子生物学技术和 实验内容。学生通过此课程既学到了适应时代前沿的技术，又大大增加了他们的实践和动 手能力。 我们为本课程设了学生实验设计，安排一到两个较新的和系统的实验题目，由学生设 计、学生自己完成实验（教师只是参与指导和讨论）。主要目的是通过学生自己设计、自 己完成实验 ,把前面学到的理论、 技术融会贯通地用到实际课题中去， 使理论与实践更好的 结合，提高学生创新性思维和独立分析、解决问题的综合能力。 该课程以本学科的基础实验技术为主，开设了 8 个实验，分为验证、综合和设计三个 类型，目的在于训练学生基本技能、实验动手能力、综合分析能力和创新能力；基本概括 了分子生物学的主要技术，实验体系较为完整，符合我院实际。教学安排中根据三个专业 培养方案的课程设置进行实验项目选择，满足各专业对本课程的具体要求。 对于验证性实验，教师可以直接根据学生所做的实验报告评判其实验成绩。综合性、 设计性实验由于所涉及的知识点数量不同，综合运用的效果不同，设计方案是否得当，步 骤是否简易可行，实验的成本、效率是否令人满意等等，都不能一概而论，因此需要教师 结合各方面进行综合的评定。 二、实验要求 1. 实验前、中、后要求 1.1 实验前 ①了解实验的目的，理解实验的原理，熟悉操作步骤，清楚实验的注意事项。 ②结合实验，查阅一定相关资料，掌握理论知识，提高实验课的效果。 ③预测本次实验结果，对预测的结果尽可能地做出合理的解释。 ④估计本次实验可能发生的问题，并思考解决问题的应急措施。 1.2 实验中 ①按要求正确使用仪器和器械，按实验步骤有序进行实验。 ②认真观察和纪录实验结果，并做必要的标记、文字说明；实验过程中还要思考会出现什 么样的结果？为什么会有这样的结果？这些结果有何意义？若出现非预期结果，还应分析 其原因，尽可能地及时解决。 ③实验中要有耐心，必须等前一步实验完成到位后，才能进行下一步操作，注意观察实验 的变化现象。 1.3 实验后 ①实验结束后要及时关闭仪器和设备的电源；按规定整理实验器具和处理废弃物。 ②及时整理实验纪录，分析实验结果，得出实验结论。 ③认真撰写实验报告，按时交给教师批阅。 2. 实验课纪律要求 2.1 上课时间提前 5