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分子生物学在医学中的应用
摘要:分子生物技术近年来发展迅速 , 已成为推动分子医学发展的重要工具。 本
文讲医学中常用的分子生物学技术。
关键词: 分子生物学 分子生物技术 医学 应用
1. 分子生物学的概述
分子生物学( molecular biology) 是在分子水平研究生命现象、生命本质、
生命活动及其规律的一门生命学科, 是生物学的一个分支。 分子生物学技术问世
于20世纪 80年代中期。这种以核酸、 蛋白质等生物大分子为研究对象的新技术自
发现以来,已经逐步成为医学领域不可或缺的诊疗手段之一 [1] 。分子生物学的发
展为人类认识生命带来了新的机会,也为人类利用和改造世界开创了广阔前景。
20 世纪末数理科学在生物学领域广泛渗透 , 在结构基因组学 , 功能基因组学
和环境基因组学逢勃发展形势下 , 分子诊断学技术将会取得突破性进展 [ 2 - 5] , 也
给检验医学带来了崭新的领域 , 为学科发展提供了新的机遇。
2. 聚合酶链式反应( PCR)在医学中的应用
PCR 的基本原理是利用双链 D NA 分子碱基配对的原则和在一定的条件下可
以无限复制的规律 , 将被检测样品中极微量的基因材料进行大幅度地扩增 , 以
提高检测试验的灵敏度。
PCR 是一种体外酶促合成特异 DNA片段的方法,是分子生物学中最常用的技
术。典型的 PCR由①高温变形、②低温退火、③适温延伸三个步骤,作为一个循
环周期,多次循环反应, 使目的 DNA得以迅速扩增。 PCR不仅可以用于基因的分离、
克隆和核苷酸序列分析等, 还可以在突变体和重组体的构建上灵活应用, 以及基
因表达调控的研究, 基因多态性的分析, 肿瘤机制的探索, 遗传病和传染病的诊
断等诸多方面。在其衍生出的新 PCR技术(定时定量 PCR、原位PCR技术等),与传
统的技术相比都具有灵敏度高、操作简单、省时省力等特点 [6] 。
3. 分子蛋白组学在医学检验中的应用
当前有关分子蛋白质组学的大量研究成果喜人 , 但一大部分结论是众说纷
纭、甚至是互相矛盾。 一些经典的肿瘤标志物却无法在当前以表面增强激光解析
离子化 - 飞行时间质谱 ( SELD I -TOF - MS) 技术为代表的蛋白质组学技术中体
现出来。可能存在以下几方面的问题。一方面是 SELD I - TOF - MS 技术自身的
限制性 , 包括敏感性、重复性以及使用当前设备对每个峰值蛋白确认的局限性 ;
另一方面是实验设计及对照组选择是否恰当 , 某个蛋白组模式反映的是肿瘤的特
异性 , 还是炎症反应 , 或是代谢紊乱等无法定论 ; 另一方面是不同实验室结果可比
性、标本处理过程的差异无法探究。只有这些问题得到解决 , SELD I - TOF -MS
技术在检验医学中才能发挥革命性作用。
4. 原位分子杂交技术在医学中的应用
邵氏分子杂交技术已被广泛应用于细菌和病毒性疾病的鉴别诊断。 原位分子
杂交是一种可以检测组织切片和细胞涂片中完整细胞内特异性 D N A 或 R N A
的新技术。此技术在病理学诊断上有广泛的实用性 , 包括病毒感染的
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