分光光度法测定蛇足石杉中总黄酮含量.docVIP

分光光度法测定蛇足石杉中总黄酮含量 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：分光光度法测定蛇足石杉中总黄酮含量 1 1 材料与仪器 2 2 方法与结果 3 3 结论 5 文2：分光光度法测定芜菁中总黄酮含量 5 1 仪器与试剂 6 2 方法与结果 6 3 结果 7 参考文摘引言： 9 原创性声明（模板） 9 文章致谢（模板） 10 正文 分光光度法测定蛇足石杉中总黄酮含量 文1：分光光度法测定蛇足石杉中总黄酮含量 Abstract：ObjectiveTo establish a method for determining the content of total flavonoids in Huperzia as reference sample, the total flavonoids content in huperzia serrata was determined by spectrophotometry at 510nm. ResultsThe linear relatiohip of rutin was good from to mg/ml, A= 57,r= average recovery was %, D%=%.ConclusionThis method is simple , rapid and accurate. It can be used for determining the content of total flavonoids in Huperzia serrata. Key words：Huperzia serrat; Total flavonoids; Rutin; Spectrophotometry 蛇足石杉Huperzia serrata，别名千层塔，蛇足草，为石杉科（Huperiaceae）石杉属(Huperzia Bernh)的一种药用蕨类植物。蛇足石杉性喜阴湿，所适应的生态环境为中亚热带常绿阔叶林和南亚热带季风常绿阔叶林及其次生生态系统，在我国分布广泛［1］，在民间常用来 治疗 跌打损伤、淤血肿痛、精神分裂等疾病［2］。蛇足石杉成分复杂，目前国内外研究较多的是其生物碱成分，其中石杉碱甲（Huperzine A）具有高效、低毒、可逆并高选择性抑制乙酰胆碱酯酶的作用而备受关注，但石杉碱甲在蛇足石杉中的含量很低，仅为万分之几［3～4］。黄酮类化合物具有抗肿瘤、抗心脑血管疾病、抗炎镇痛、免疫调节、抗病毒、抗衰老以及抗辐射等作用而格外引人瞩目，为了对该药用植物资源进行综合利用，采用乙醇为溶剂，以芦丁为对照品，采用分光光度法对其中的黄酮类物质进行了研究，为进一步有效地开发和综合利用蛇足石杉资源提供 参考 ［5，6］ 1 材料与仪器 材料蛇足石杉，购自四川峨眉，经鉴定为蛇足石杉全草，60℃烘干，粉碎过20目筛备用。对照品芦丁，购自成都思科华生物技术有限公司（HPLC＞98%），其余试剂均为分析纯，实验用水为实验室自制去离子水。 仪器UV-2102 PC型紫外分光光度计K［尤尼柯（上海）仪器有限公司］；RE 52-86A型旋转蒸发器（上海亚荣生化仪器厂）；MAS-1型常压微波辅助合成萃取反应仪（上海新仪微波化学科技有限公司） 2 方法与结果 供试品溶液的制备取5 g蛇足石杉粗粉，加入适量的80%乙醇-水溶液（V/V），静置10 min，于微波炉中在600 W功率下辐照1 min，加入80%乙醇溶液100 ml，80℃回流提取2次，每次30 min，合并2次滤液，置于250 ml的容量瓶中，加80%乙醇-水溶液至刻度，待用。蛇足石杉中总黄酮含量按下式 计算 ： 总黄酮含量（%）= CV1V31 000V2m×100% 其中 C-样品溶液浓度（mg/ml）； V1-比色管中的定容体积（ml）；V2 -移取到比色管中的提取液体积（ml）； V3-提取液体积（ml）；m-蛇足石杉粗粉质量（g） 对照品溶液的配置称取干燥至恒重的芦丁标准品 mg，用60%的乙醇-水溶液（V/V）溶解，定容至50 ml，摇匀得 mg/ml的芦丁贮备液。 检测波长的确定取 ml的 0 mg/ml芦丁标准溶液置于25 ml比色管中，用60%的乙醇水溶液稀释至 ml，再加入 ml 5%的亚硝酸钠溶液，摇匀，静置6 min，加入 ml的10%硝酸铝溶液，摇匀，再静置6 min，加入 ml的10%氢氧化钠溶液，定容至25 ml。放置15 min后，以试剂空白作参比，波长间隔为1 nm，用1 cm的玻璃比色皿在400～700 nm波长范围内用紫外可见光分光光度计进行扫描，扫描曲线如图1中实线所示： 取“”项中的待测液 m