蛇床子提取物抗解脲支原体作用的研究.docVIP

蛇床子提取物抗解脲支原体作用的研究 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：蛇床子提取物抗解脲支原体作用的研究 1 1 材料与仪器 2 2 方法 3 3 结果 4 4 讨论 4 文2：黄芩素体内抗甲型流感病毒作用的研究 5 1材料与方法 6 11药物 6 12动物 6 13流感病毒株 6 14对小鼠流感病毒性肺炎的影响 7 15对小鼠体内感染流感病毒的死亡保护作用 7 16病毒检查 7 17统计学方法 7 21黄芩素对小鼠流感病毒性肺炎的影响 8 22黄芩素对体内感染流感病毒小鼠的死亡保护作用 8 23肺组织病理检查结果 8 参考文摘引言： 9 原创性声明（模板） 10 文章致谢（模板） 11 正文 蛇床子提取物抗解脲支原体作用的研究 文1：蛇床子提取物抗解脲支原体作用的研究 Abstract：ObjectiveTo study the anti-Ureaplasma urealyticum effect of Fructus Cnidii was cultured in a liquid medium and the bacteriostasis of the Fructus Cnidii extract agait Uu was results showed that the range of MIC of Fructus Cnidii extract agait Uu was ~125 μg/ Cnidiiertract has obvious inhibitory action agait Uu. Key words：Fructus cnidii extracts; Ureaplasma urealyticum; MIC 蛇床子有杀虫之功效,是 治疗 阴痒带下之常用药。许多 文献 报道其提取物对真菌有抑制作用，蛇床子水提取物还对一些细菌有杀灭作用［1，2］。但有关蛇床子抗解脲支原体的作用目前未见报道。为了证实蛇床子抗解脲支原体作用，探讨其作用机制，笔者对其进行了体外抗菌实验的研究。 1 材料与仪器 菌株解脲支原体标准菌株（Uu3），由首都儿科研究所馈赠。 药物蛇床子由黑龙江省中医研究院中药所提供。 培养基的配制取心脑浸液70 ml(pH ～),加胎牛血清20 ml，加鲜酵母浸液10 ml,加20万U青霉素 ml，加20％尿素1 ml,混匀后置冰箱备用。 仪器电热压力蒸气灭菌器DL-CJ-2F型医用洁净工作台，DH5000电热恒温培养箱， ESJ60-4 电子 天平， 微量加样器，96孔微量细胞培养板等。 2 方法 解脲支原体培养 将标准冻干Uu3型菌株用2 ml培养液在室温下混匀、密封，置于37℃恒温培养箱中孵育18~36 h,当培养液颜色由黄变为红色且液体澄明时，表示支原体培养为阳性。 解脲支原体浓度的测定（CCU测定）取无菌试管10支，将Uu菌液 ml从第1管至第10管以10倍梯度倍比稀释成10－1～10－10 系列浓度，密封后置于37 ℃恒温培养箱，1周后观察Uu生长情况，以发生颜色变化的最高稀释度作为颜色改变单位（color change unit,CCU），菌液浓度以CCU/ml计［3］ 药物溶液的配制蛇床子提取物（主要成分为蛇床子素）用95%乙醇溶解成1 g/ml原液，滤菌器除菌后用无菌磷酸盐缓冲溶液稀释为2 mg/ml(pH ～)。红霉素用95%无菌乙醇溶解成1 g/ml原液后用生理盐水稀释成 mg/ml。 MIC的测定 将Uu菌液用培养基稀释为104～105 CCU/ml，在微量反应板每行的第1孔中按表1顺序加入200 μl药液，第2孔至第12孔分别加入100 μl液体培养基。取第1孔药液100 μl加入第2孔中混匀后再取100 μl加入第3孔中混匀……如此反复,按次序将药物从第1~10孔倍比稀释成表1所标浓度。在微量反应板第1~11孔内分别加入100 μl菌液为阴性对照孔，第12孔加100 μl培养基做为阳性对照孔。每孔内滴入1滴灭菌液体石蜡，37℃孵育7 d。培养液由黄色变为红色为阴性，不变色为阳性。每种药物重复3行，每日做1次，连续3 d。以不出现颜色变化的最小浓度为最小有效抑制支原体生长的药物浓度（MIC）［4］。见表1。 表1 受试药物稀释浓度（略） 3 结果 各受试药物对解脲支原体的最低抑菌浓度如下： 蛇床子提取物：～125 μg/ml；红霉素：4～8 μg/ml。 4 讨论 解脲支原体(Ureaplasma urealyticum,Uu), 属于柔膜纲支原体目支原体科的脲原体属，是介于细菌和病毒之间能独立存