高级生化实验报告二.docVIP

.. . . .. 实验二 Western blotting 检测大肠杆菌重组蛋白 一、背景 印迹法（blotting ）是指将样品转移到固相载体上 ，尔后利用相应的探测反 应来检测样品的一种方法 。 1975 年， Southern 成立了将 DNA 转移到硝酸纤维素膜 （ NC 膜）上，并利 用 DNA-RNA 杂交检测特定的 DNA 片段的方法 ，称为 Southern blotting 。以后 ， James Alwine 、 David Kemp 和 George Stark 三位教授又发了然 RNA 杂交检测 技术，因与 Southern blotting 相像，故命名为 Northern blotting 。George Stark 这位教授在两年后又开发出近似的蛋白质检测方法 。 1981 年，在 Neal Burnette 所著的 Analytical Biochemistry 中，初次将单向电泳后的蛋白质分子的 印迹剖析称为 Western blotting 。 今后开发的 Eastern blotting 是 Western blotting 的变形，对双向电泳后蛋白质分子的印迹剖析称为 Eastern blotting 。 30 多年来，Western blotting 技术已成为蛋白质研究中最常用的工具 ，用于鉴 定目的蛋白能否存在 （定性）