hiv检测及临床意义.ppt

HIV感染后抗原和抗体 改变及其与疾病关系 HIV感染人体后出现一过性病毒血症, 6-8周后血清抗体阳转, 病毒滴度降低, 在随即 5-8年无症状带毒期里HIV抗体一直存在, 但病毒难查到。进入AIDS期后血浆中病毒再次出现。 故诊疗HIV感染多数时间用抗体检测诊疗, 极早期（窗口期）用抗原检测。 HIV抗体诊疗 现在临床上实际应用 是测定特异性HIV抗体, 包含初筛和确定试验。 一、检测试剂 筛查试剂必需是HIV-1/2混合型、经国家药品监督管理局注册同意、批批检合格、临床评定质量优良、在使用期内 试剂。 现在常见 筛查试剂有酶联免疫、颗粒凝集和其它快速诊疗试剂。采供血机构进行血液筛查应采取酶联免疫试剂。 自采自供血 单位必需进行HIV抗体检测, 在还未建立艾滋病筛查试验室 偏远地域可由经过培训 技术人员在要求 场所用快速试剂进行血液筛查。 2、确定试剂必需经国家药品监督管理局注册同意。确定试剂包含免疫印迹试验、条带免疫试验及免疫荧光试验试剂。现在以免疫印迹试剂最为常见。 ELISA方法: 现在最常见 初筛试验, 自1985年首次检测HIV-1抗体 试剂盒供市以来, 已从第一代 全病毒抗原间接法发展到第四代 以重组 多肽抗原及抗P24抗体包被 双夹心法, 使窗口期缩短了2-3周。 四代艾滋病酶联免疫试剂比较 solid phase specific detection of conjugate 第一代 病毒裂解液 HIV-1 IgG 抗体 HIV-1 -IgG抗体 第二代 病毒裂解液 重组抗原合成肽 HIV-1 / -2 IgG 抗体 HIV-1 / -2 IgG抗体 第三代 病毒裂解液 重组抗原合成肽 HIV-1 / -2 / -O IgM / IgG 抗体 HIV-1 / -2 / -O 病毒裂解液 重组抗原合成肽 HIV-1 / -2 / -O 第四代 病毒裂解液 重组抗原合成肽 HIV-1 / -2 / -O anti-p24 Ab IgM / IgG 抗体 HIV-1 / -2 / -O p24 抗原 病毒裂解液 重组抗原合成肽 HIV-1 / -2 / -O anti-p24 抗体 检测结果 汇报和处理 阴性反应出具HIV抗体阴性汇报, 假如近期有高危行为, 如性乱、注射毒品等, 或有急性流感样症状等情况, 为排除“窗口期” 可能, 能够进行HIV-1 P24抗原或HIV核酸检测, 或2－3个月以后再做抗体检测。 筛查试验呈阳性发觉反应, 可出具“HIV抗体待复查” 汇报, 不能出阳性汇报。 样　　本 初筛检测 一阴一阳 均阳性反应 阴性报告 送确认 重复检测 阴性报告 均阴性反应 阳性反应 原有试剂＋另一 种原理初筛试剂 选用初筛试剂 阴性反应 HIV抗体初筛检测步骤图 快速诊疗试剂: 采取乳胶凝集、免疫斑点和免疫层析三种原理 快速、不需特殊仪器 敏感度、特异度低于ELISA, 且价格贵 适适用于血站覆盖不到 边远地域/城市大医院急诊手术前检验 快速诊疗阳性结果还需经ELISA方法验证 HIV抗体确定 常见 确定试验方法是免疫印迹法（WB）。 免疫印迹试剂有HIV-1/2混合型和单一型。通常先用HIV-1/2混合型试剂进行检测 蛋白印迹试验（WB） ——广泛使用 确定试验 用聚丙烯酰胺凝胶电泳将纯化 HIV蛋白抗原分开后转移到硝酸纤维膜上。标本中存在 HIV抗体与条带上 抗原结合, 再加入酶偶联 抗人IgG抗体和底物, 在抗原抗体结合 部位会出现有色条带 其可检测标本中针对HIV不一样抗原 抗体, 故被用做确定试剂。 不一样 研究机构有不一样 判定标准 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? HIV抗体确定检测步骤图 免疫印迹法(HIV1/2混合型) HIV-1阳性反应 可疑反应 出现HIV-2指带 HIV-1阳性汇报 可疑反应 阳性反应 阴性反应 汇报HIV-2血清学阳性反应汇报必需时测核酸 阴性汇报 免疫印迹法（HIV-2） 每3个月随访一次, 共2次, 仍属可疑, 则作阴性汇报如随访期间出现阳性反应则汇报阳性 阴性反应 阴性汇报 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? P24抗原测定 （一）适用范围 HIV-1抗体不确定或窗口期 辅助诊疗。 HIV-1阳性母亲所生婴儿 判别诊疗。 第四代HIV-1抗原/抗体ELISA试剂检测呈阳性反应, 但HIV-