动物细胞工程主体.ppt

8．单克隆抗体的制备过程如下图所示： (1)淋巴细胞能与骨髓瘤细胞融合成一个细胞，两种细胞膜也能“融合”在一起，说明细胞膜______________。此过程，常用_________作为诱导剂 。 (2)已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增殖，将这两种细胞在试管中混合，加聚乙二醇促融，获得杂种细胞。请设计一种方法(不考虑机械方法)，从培养液中分离出杂交瘤细胞。 方法：_______________________________________。 聚乙二醇 培养液中加入氨基嘌吟，收集增殖的细胞 具有一定的流动性 (3)杂交瘤细胞繁殖进行的是________分裂，其遗传性状_____________________________________。 (4)杂交瘤细胞的体外培养与植物组织培养的培养基相比有何主要不同？_____________________________________。 (5)单克隆抗体注入体内后可以自动追踪抗原(病原体或癌变细胞等)并与之结合，而绝不攻击任何正常细胞，故称为“生物导弹”，这是利用了___________________________________。 (6)在单克隆抗体制备过程中，还应用了细胞工程中的_____________和______________两大技术。 具有无限增殖能力，能产生特异性抗体 动物细胞培养用的是液体培养基，且其中含有动物血清 动物细胞培养 抗原与抗体之间结合的高度特异性 有丝 动物细胞融合 9.现有甲、乙两种可能有一定毒性的化学物质，实验室研究人员欲通过动物细胞培养的方法来鉴定它们是否有毒性并比较二者毒性的强弱。请你以一个研究人员的身份参与此项研究，完成下列实验报告并回答有关问题。 Ⅰ.实验原理：_________________________________。 根据这种变异细胞占全部培养细胞的百分数（以下称Q值），可判断该化学物质的毒性。 Ⅱ.实验材料：活的小白鼠胚胎。 Ⅲ.药品用具：略。 有毒物质能诱导细胞产生变异 Ⅳ.实验步骤 （1）制备细胞悬浮液。（2）进行细胞培养 ①取A、B、C三个洁净的培养瓶，___________________。 ②向A培养瓶中加入一定量的化学物质甲，向B培养瓶中加入等量的化学物质乙，并将培养瓶摇匀。 ③向C瓶内___________________。 （3）制作临时装片 ①取培养细胞，再加入动物细胞固定液以迅速杀死细胞并固定细胞。②静置一段时间后，分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞悬浮液，滴在与培养瓶有相同编号的载玻片的中央，_______________________，3 min～5 min后，盖上盖玻片。 用适宜浓度龙胆紫溶液染色 加入等量蒸馏水 消毒灭菌，加入等量的细胞悬浮液 （4）镜检和统计 把临时装片放在显微镜下，先用低倍镜后用高倍镜，寻找处于__________期的细胞，并与________对比以确认发生变异的细胞，同时统计该期变异的细胞占全部培养细胞的百分数（Q值）。 Ⅴ.结果与结论 经研究人员实验得知：A、B、C三个培养瓶的Q值依次为：QA=1.3%、QB=12.5%、QC=0.1%，由此可知该实验的结论是 ____________________________________________。 Ⅵ.回答问题：在实验中，C培养瓶起什么作用？ _______________。 有丝分裂中 C组 对照 甲、乙都是有毒性的，且乙的毒性大于甲 Ag B1 B2 B3 B4 B3 B3 B3 B3 2 3 4 1 Ag B1 B2 B3 B4 B3 B3 B3 B3 2 3 4 1 细胞贴壁现象 细胞在贴壁生长过程中,随着细胞分裂,数量不断增加,最后形成单层细胞,此时细胞间相互接触,细胞分裂和生长停止。 接触抑制 核移植：是将动物的一个细胞的细胞核,移如入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育为动物个体。核移植分为体细胞核移植和胚胎细胞核移植。 细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基喋呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增殖。将这两种细胞在试管中混合，加聚乙二醇促融，然后再培养液中加入氨基喋呤。 B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 合成DNA D途径 S途径 D途径 氨基喋呤 专一抗体检验阳性 有限稀释法进行单克隆： 通过适当的稀释达到分离单个细胞进行培养的目的。 （1）取出阳性孔的细胞进行计数。 （