第五章中药制剂中怀各类化学成分分析课件.ppt

第一节 生物碱类成分分析;第一节 生物碱类成分分析;第一节 生物碱类成分分析;第一节 生物碱类成分分析;第一节 生物碱类成分分析;第一节 生物碱类成分分析;第一节 生物碱类成分分析;第一节 生物碱类成分分析;第一节 生物碱类成分分析;第一节 生物碱类成分分析;第一节 生物碱类成分分析;第一节 生物碱类成分分析;第二节 黄酮类成分分析;中药名称;第二节 黄酮类成分分析;第二节 黄酮类成分分析;第二节 黄酮类成分分析;4、显色反应 还原反应：与盐酸—镁粉（或锌粉）反应（显红色或??红色） 金属盐类试剂的络合反应：黄酮类化合物分子中多有下列结构，故常可与铝盐、铅盐、锆盐、镁盐等试剂反应，生成有色络合物。 ; 铝盐：常用试剂为1%三氯化铝或硝酸铝溶液。生成的络合物多为黄色（λmax=415nm）,并有荧光，可用于定性及定量分析。 铅盐：常用1%醋酸铅及碱式醋酸铅水溶液，可生成黄至红色沉淀。据此不仅可用于鉴定，也可用于提取及分离工作。 锆盐：多用2%二氯氧化锆甲醇溶液。黄酮类化合物分子中有游离的3-或5-OH存在时，均可反应生成黄色的锆络合物。 但两种锆络合物对酸的稳定性不同，当反应液中接着加入枸橼酸后，5-羟基黄酮的黄色溶液显著褪色，而3-羟基黄酮溶液的呈鲜黄色（锆—枸橼酸反应）。 ;5、紫外光谱特征 黄酮类由于具有2-苯基色原酮的基本结构，具有特定的紫外吸收峰，常有两个较强的吸收带，I带在300—400nm范围内，它是由于B环桂皮酰基引起的，Ⅱ带为240—285nm范围内，它是由于A环上的苯甲酰基引起的。 黄酮类化合物当加入一些位移试剂如甲醇钠、醋酸钠、氯化铝等，可使最大吸收波长发生位移，选择性提高，还可消除杂质的干扰，有利于含量测定。 ;第二节 黄酮类成分分析;四、含量测定 （一）总成分的含量测定 中药制剂中如含有黄酮类成分，可根据要求测定制剂中的总黄酮含量、黄酮类单体成分的含量或二者同时测定。 直接测定:直接于最大吸收波长处测定其吸收度, 以芦丁等为对照品计算其含量. 显色测定: 黄酮类化合物显色以后显色物与背景最大吸收波长差别较大,可消除背景(即阴性空白)的干扰,以提高本法的选择性及灵敏度.常用铝盐作显色试剂.;四、含量测定 （二）黄酮类单体成分的含量测定 1、薄层色谱法 样品经有机溶剂或水提取后，可用硅胶、纤维素或聚酰胺进行层析，达到分离目的。 层析后可将含有待测组分的色斑刮下，再用适当的溶剂洗脱后，用紫外-可见分光光度法测定。 更常用的是薄层扫描仪（单波长或双波长法）直接在薄层板上扫描测定。 ;（二）黄酮类单体成分的含量测定 2、高效液相色谱法 由于黄酮类化合物在紫外区有较强的吸收，使用HPLC法检测灵敏度较高，故该法在黄酮类单体成分的定量分析中最常用。 黄酮类成分的HPLC条件他为正相和反相色谱两类，反相色谱应用较多。 反相色谱测定多有C18键合相固定液，流动相常用甲醇-水-乙酸（或磷酸缓冲液）及乙腈-水。检测器主要采用紫外检测器或荧光检测器。 ;应用示例;3、供试品溶液的制备：精密量取本品1ml，置50ml量瓶中，加50%甲醇适量，超声处理20min，放置至室温，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。 4、测定：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5ul，注入液相色谱仪，测定，即得。 本品每支含黄芩以黄芩苷（C21H18O11）计，不得少于80mg。;第三节 三萜皂苷类成分分析;;第三节 三萜皂苷类成分分析;二、理化性质 1、溶解度： 可溶于水，易溶于热水、含水稀醇、热甲醇和热乙醇中，几乎不溶于或难溶于乙醚、苯等极性小的有机溶剂。 在含水丁醇或戊醇中溶解度较好，且又能与水分成二相，可利用此性质从水溶液中用正丁醇或戊醇提取皂苷，借以与亲水性的糖、蛋白质等分离。 三萜皂苷元能溶于石油醚、苯、乙醚、氯仿等有机溶剂，而不溶于水。;第三节 三萜皂苷类成分分析;第三节 三萜皂苷类成分分析;第三节 三萜皂苷类成分分析;第三节 三萜皂苷类成分分析;（二）皂苷元的含量测定 皂苷元的获得： 得到总皂苷后，加酸（如硫酸、盐酸）加热水解，得到皂苷元； 将样品先行水解，再用有机溶剂从水解后的溶液中提取皂苷元。 测定方法：主要有薄层色谱法、高效液相色谱法和比色法。; 三萜皂苷类单体成分含量测定： （1）薄层色谱法 样品经适当的提取、纯化后，用薄层色谱法分离，可排除其他组分的干扰，常用于测定中药制剂中的皂苷元或单体皂苷，定量方法可采用薄层洗脱—比色法或薄层扫描法。 ; 三萜皂苷类单体成分含量测定： （2）高效液相色谱法 大多数三萜皂苷类成分，