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Gram+ Gram- G+ 和G- Bacteria can be divided into two major groups, called gram-positive and gram-negative. The original distinction between gram-positive and gram-negative was based on a special staining procedure, the Gram stain G+细菌的细胞壁 细胞壁的主要化学成分为: 肽聚糖(peptidoglycan),原核生物所独有的结构,是细胞壁的基本骨架。 N-乙酰葡萄糖胺(以G表示)与N-乙酰胞壁酸残基(以M表示)以?-1,4-糖苷键交替连接,形成聚糖的骨架(主链);一组相同的短肽侧链接于NAM上; 相连主链上的短肽侧链通过一条肽桥、或直接相连,从而形成网状分子结构。 G+细菌(S.aureus)的细胞壁--肽聚糖 + 磷壁酸 (1)单体组成(二糖——四肽——肽桥) (2)交联方式—五聚甘氨酸 肽桥 (3)磷壁酸(teichoic acid )可达壁重的50%,细 胞干重的10%。 L-Ala D-Glu L-Lys D-Ala L-Ala D-Glu L-Lys D-Ala 根据结合部位的不同分为: 壁磷壁酸:含量多,与肽聚糖分子发生共价结合,并延伸到肽聚糖分子表面, 带有负电荷。膜磷壁酸:与细菌细胞膜的脂类共价结合。 磷壁酸的主要生理功能 G-细菌的细胞壁--肽聚糖层+外膜层(其中肽聚糖层占细胞干重的10%左右) (1)单体组成 (2)交联方式: meso-DAP~D-Ala (3)外膜层: 脂蛋白+脂多糖(LPS) 类脂+蛋白质 类脂A+ 核心多糖 +O-特异侧链 LPS的主要功能 为G-细菌特有,是细菌内毒素的主要成分(热原质) 吸附Ca2+、Mg2+,提高其膜表面浓度; LPS决定了表面抗原决定簇的多样性; 是许多噬菌体的吸附受体。 革兰氏阳性菌与阴性菌细胞壁结构比较 细胞壁 革兰阳性菌 革兰阴性菌 强度 较坚韧 较疏松 厚度 20-80nm 10-15nm 肽聚糖层数 可多达50层 1-2层 肽聚糖含量 占细胞壁干重50%-80% 占细胞壁干重5%-20% 磷壁酸 + — 外膜 — + 脂蛋白 — + 脂多糖 — + 青霉素、溶菌酶对细胞壁的作用及细胞壁缺陷细菌 青霉素对细菌细胞壁的作用 Penicillium与转肽酶结合,而使该酶失活,抑制了侧链末 端的丙氨酸与五肽桥的连接,破坏了细菌细胞壁的完整性( 即抑制肽聚糖合成最后阶段的交联作用转肽反应,对G+和 G-都一样),因此, Penicillium仅对正在生长着的细菌, 且主要是对G+菌有效。 G+ G- 溶菌酶对细胞壁的作用 可切断NAM和NAG之间 的?-1,4-糖苷键,引 起细菌裂解。 对Gˉ菌,在EDTA存 在下,受溶菌酶作用。 溶菌酶处理后的菌细 胞应保存在弱高渗 (0.1-0.2M)蔗糖液中。 细胞壁缺陷细菌 ①原生质体 protoplast 在人工条件下用溶菌酶除尽原有的细胞壁(G+)或用青霉素抑制细胞壁的合成,所留下的仅由细胞膜包裹着的脆弱细胞。 ②圆球体 spheroplast 还残留部分细胞壁的原生质体,一般由革兰氏阴性菌所形成。 ③L型细菌 L-form 由自发突变而形成的细胞壁缺损的细菌。 细胞壁的主要功能 2、细胞膜 概念 细胞膜是紧贴细胞壁内侧包 围细胞质的一层柔软,富有 弹性的半透明薄膜。 观察分离方法 (1)质壁分离 (2)选择性染色 (3)电镜技术 (4)溶菌酶处理 细胞膜的结构与化学组成 细胞膜的基本成分是由两层磷脂分子整齐的排列而成。 蛋白质(60~70%) 磷脂(骨架,20~30%) 少量糖 细胞膜液态镶嵌模型 细胞膜的功能 间体 (mesosome) 细胞膜内褶形成的一种管状、层状或串状物,一般位于细胞分裂的部位或附近。 间体的功能: 1、参与隔膜形成 2、与核分裂有关 3、类似线粒体功能 细胞质及内含物 细胞膜内除核质体外的一切半透明、胶状、颗粒状 物质可总称为细胞质。 主要成分有: H2O 、Protein、DNA/RNA、脂类、糖类、无机盐。 细胞质内形状较大的颗粒状构造为内含物:包括各 种贮藏物和气泡、羧酶体等。 细胞质功能: 细胞质中含有丰富的酶系,是营养物质合成、转 化、代谢的场所。 核糖体(ribosome) 是分散在细胞质中沉降系数为70S的颗粒状结 构,由核糖体核酸r-RNA(占60%)和蛋白质 (占40%)组成。 细菌的核糖体 沉降系数为:70s,由50s大亚基和
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